2017高考生物一轮复习生物技术实践专题二微生物的培养和利用选编.ppt

2．(2015·江苏单科)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题： (1)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是________________(填序号)。 ①酒精灯　②培养皿　③显微镜　④无菌水 (2)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是_____________________ _________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是________ ______________________________________________________________ 。 (4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的________________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是________________(填图中序号)。 (5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株Jl和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株________________更适合用于人工瘤胃发酵，理由是________________________ ______________________________________________。 解析　本题考查微生物培养与分离的相关知识。(1)样品稀释需用无菌水，在培养基中涂布接种时需在酒精灯的火焰旁进行。(2)涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液一般为0.1mL，量过大将导致菌体密度过大而影响分离效果。(3)分装含琼脂的培养基时，试管口粘有培养基易造成杂菌滋生，故应用酒精棉球擦净。(4)纤维素酶活性越大，菌落周围被分解的纤维素量也越大，菌落周围的透明圈也就越大。故图中降解纤维素能力最强的菌株为①。(5)发酵过程中由于呼吸作用产生较多的热量和有机酸，故应选择较高温度和酸性环境中活性较高的J4酶。 答案　(1)③ (2)培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分 离效果 (3)避免培养基污染棉塞 (4)量与活性　① (5)J4　发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高 3．(2014·四川)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是________________。 (2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________________保存备用。 (3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________ 。 (4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是______________________，该实验设计是否合理？为什么？_____________________________ 。 解析　(1)微生物生长所需要的主要营养物质包括：碳源、氮源、水和无机盐。使用选择培养基是因为它是允许特定的微生物生长和增殖，同时又能抑制或阻止其他微生物生长和增殖的培养基，该实验所用培养基只有能利用苯磺隆的微生物才能正常生长和增殖。(2)植物组织培养常需要添加的植物激素有生长素和细胞分裂素，调整二者的比例可以诱导脱分化和再分化。MS培养基的成分一般先分别配制成母液备用。 (3)平板划线法接种时常使用接种环划线。第二区域只有第一条线无菌落，而其他的划线却有菌落，很可能是因为接种环在灼烧后未冷却，第一次划线时将菌种烫死，而后接种环冷却，能正常划线，也可能是第一次划线时划线未从第一区域末端开始，使接种环上无菌种。(4)题中实验将取得的菌种培养液过滤后离心，上清液加入蛋白酶处理后，