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复习资料细胞工程修改版
目 录
名词解释 1
一、细胞全能性 4
ES细胞的特性、建立、鉴定 4
植物细胞全能性 5
影响植物细胞脱分化和再分化的因素 5
二、细胞培养 5
动物细胞体外培养细胞分型、生长特点、增殖过程 5
植物细胞大规模培养 6
三、细胞融合 6
细胞融合的常用方法、原理、过程、应用 6
植物原生质体融合的方法、原理、过程、用途 7
四、转基因技术 8
制备转基因动物的主要方法、过程(P142) 8
转基因动物的应用 8
植物转基因的方法、过程、目的 9
植物转基因技术、传统有种技术和体细胞杂交技术异同: 10
五、染色体工程 10
动物单倍体和多倍体的获得方法、过程、目的 10
植物单倍体和多倍体的获得方法、过程、目的 11
六、快速繁殖 12
胚胎工程包含的技术 12
植物组织培养 13
习题 14
名词解释
1.细胞工程 (cell engineering):是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。胚胎工程 (embryonic engineering) 是指对配子或胚胎进行人为地干预,使其环境因素、发育模式或局部组织功能发生量和质的改变。胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)是从早期胚胎内细胞团(ICM)分离出来的,能在体外培养的一种高度未分化的多能干细胞。包括畸胎瘤细胞 (teratocarcinoma cells, EC)胚胎干细胞 (embryonic stem cells, ES)原始生殖细胞 (primordial germ cells, PGC 或 EG)。细胞系 (cell line): 原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。细胞株 (cell strain):细胞融合(cell fusion):又称体细胞杂交(somatic hybridiazation),单克隆抗体只针对某一抗原决定簇的抗体分子。
单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术(hybridoma technology ): 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖,又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。
转基因动物(transgenetic animal):指借助基因工程技术将外源基因导入受体动物染色体内,外源基因与动物基因整合后随细胞的分裂而扩增,在体内表达并能稳定地遗传给后代的动物。
显微注射转基因技术:磷酸钙—DNA共沉淀法基因转移技术:这种方法是受二价金属离子能促进细胞吸收外源DNA的启发而发展起来的。当核酸以磷酸钙—DNA共沉淀物的形式在时,细胞摄取DNA的能力显著加强。但转移效率较低,仅有1%~5%的外源DNA可以进入受体细胞核中,大约仅有1%的DNA可以在细胞中稳定表达。
脂质载体包埋法:将需要转移的外源DNA或RNA包裹于脂质体内,由于脂质体具有磷脂双层结构,与细胞膜类似,因此可以与受体细胞膜融合,从而将外源DNA转入宿主细胞。
基因的显微注射法:借助光学显微镜的放大作用,利用显微操作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中,然后生产动物个体的技术。染色体工程(chromosome engineering):指人们按照一定的设计,有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体,从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。动物生物反应器(bioreactor)一般为把目的片段在器官或组织中表达的转基因动物.
基因敲除(gene knock out),是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。基因转导:将构建好的重组基因用基因转导方法转移到受精卵。
胚胎移植(embryo transfer)也称受精卵移植,是指将良种母畜配种后,从其生殖道(输卵管或子宫角)取出受精卵或早期胚胎,移植到同种生理状态相同的母畜体内,使之继续发育成为新个体技术,所以也称为“借腹怀胎”。动物克隆:不经过有性生殖过程,而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术。
核移植技术:利用显微操作技术将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞中,或者将两个细胞的细胞核(或细胞质)进行交换,从而可能创造无性杂交生物新品种的一项技术。
胚胎克隆:使用的核供体细胞如果来自多细胞阶段的胚胎,叫做胚胎克隆。
体细胞克隆:使用的核供体细胞来自动物体,叫做体细胞克隆。
体外受精(In Vitro Fertilization,IVF)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完
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