川佛手总黄酮提取及抗氧化性.pdf选编.docVIP

340一 江苏农业科学 2010年第 3期 姜立春，黄成思，杨 澈，等．川佛手总黄酮提取及抗氧化性研究[J]．江苏农业科学，2010(3)：340—342 川佛手总黄酮提取及抗氧化性研究 姜立春，黄成思 ，杨 澈 ，阮期平 (1．绵阳师范学院分子生物学与生物制药重点实验室 ，四川绵阳 621000；2．吉林师范大学，吉林四平 136000) 摘要：研究药用植物川佛手总黄酮的最佳提取工艺，为该药材质量研究奠定基础。以佛手作为研究材料，采用单 因素和正交试验优化了提取工艺，用 pH值梯度法和溶剂萃取法对粗黄酮进行了纯化精制，并对其抗氧化性进行了研 究。结果表明：川佛手总黄酮的最适宜提取工艺是提取温度 60℃ ，超声功率为 420W，提取时间40 min，超声提取 2 次，采用乙醇浓度 70％，料液比为 1：15。精制后的佛手总黄酮对猪油抗氧化能力较强，其抗氧化能力强于柠檬酸。 该提取工艺操作简单，经济省时，方便可行。 关键词：川佛手；总黄酮；超声 波辅助法；提取 工艺；抗氧化性 中图分类号：$666．901 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2010)03—0340—03  佛手(bergamot)系芸香科柑橘属植物佛手 [Citrusmedica L．var．sarcodactylis(Noot)Swingle]的干燥果实。味辛、苦、 酸，性温，人肝、胃、肺经。有舒肝理气，和胃止痛之功，用于肝 胃气滞、胸胁胀痛、胃脘痞满、食少呕吐等症 J，主要分 布于 热带和亚热带。佛手在我国栽培历史悠久，分布 较广，四川 、 浙江、福建、江苏、广东、广西等省区都有种植。在《中国药 典》(2005年版)和其他文献记载中，不同产地佛手均来源于 同一种植物，商品佛手因产地不同有广佛手、川佛手、金佛手 和建佛手之分 。药理实验表明，佛手 有解痉与中枢抑制作 用、对心血管系统作用、抗过敏和抗炎等作用 。黄酮类物 质是一类有多种生物学功能特性的物质，广泛用于医药、保健 食品中，具有抗菌消炎、抗辐射、调节毛细血管壁的渗透、血管 的脆性、防止血管破裂、止血和对紫外线有极强的吸收以及很 好的抗氧化等作用 。 本研究以总黄酮为检测指标，紫外分 光光度法为检测手 段，利用单因素分析和正交试验设计，对川佛手中总黄酮提取 工艺进行了研究，为质量控制以及药理活性等方面研究提供 技术依据。 1 材料与方法 1．1 材料和仪器 川佛手(四川省中江县)、芦丁(上海试剂二厂)、猪油(湿 法熬制，市售板油洗净后文火中熬炼而成，装入容器中低温保 存)，其他试剂均为分析纯。紫外可见分光光度计(Uhrospec 3300pro)，超纯水系统(Milli—Q)，旋转蒸发仪(BuChi)，数控 超声波清洗器(KH一600DB)，电子天平 (FA1104)，真空 干燥 箱 (DZF一6050)，恒温水浴锅 (HH一6)。 1．2 试验方法 1．2．1 材料处理 将川佛手饮片放入恒温干燥箱内 ，调节温 度5O℃，干燥 24h。将干燥后的佛手饮片用药物粉碎机粉 收稿日期：2009—10—15 作者简介：姜立春(1977一 )，男，四川绵阳人，硕 士，讲师，从事天然产 物和微生物方面的研究。E—mail：jiangjichun@126．COI1]。 通信作者：阮期平，博士，教授，从事微生物与生化药学方面的研究。 E —mail：rqp2200070@ yahoo．corn．vii。  碎，将粉末过 3号筛，收集过筛后的粉末 。 1．2．2 标准曲线绘制 准确称取经干燥恒重的芦丁标准品 20．0mg，用浓度 30％的乙醇溶解并定容至 100mL，摇匀得浓 度为 0．2mg／mL的芦丁标准液。分别称取此标准溶液 0、 1．0、2．0、4．0、6．0、8．0、10．0mL于 7支 25mL容量瓶中。分 别于 7支容量瓶依续首先加入 30％ 乙醇溶液至 l2．5mL，再 加入 0．7 mL质 量分数为 5％ 的亚硝酸钠溶液，摇 匀，放置 6min，然后加入 0．7mL质量分数为 10％的硝酸铝溶液，摇 匀，放置6min，后加入 5mL1mol／L的氢氧化钠溶液混匀，最 后用30％的乙醇定容至刻度，放置 10rain。以蒸馏水为空白 参比，于 510nm测定吸光度值，以吸光度 Y为纵坐标，黄酮浓 度 为横坐标，绘制标准曲线 。 1．2．3 提取溶剂的选择 (1)水提取法。精确称取佛手粉 4g共4份，各用20mL石油醚回流 2h脱脂去杂质。分别将 4份脱脂后的佛手粉用定性滤纸过滤，用石油醚洗脱滤液直 至无色，收集滤渣。将滤渣放入烘箱内 50℃干燥，收集干燥 后的干粉。向