第四章 比分析与分光光度分析.ppt

《发酵工业分析》 比色法的发展 第一节 概 述 1 光度分析法的特点 2 物质对光的选择性吸收 3 光吸收的基本定律 4 常用仪器 5 显色反应及显色条件的选择 6 影响比色与分光光度分析的因素 1 光度分析法的特点 有色物质颜色的深浅和浓度有关，利用比较溶液颜色深浅来测定含量的分析方法称为比色分析法。 目视比色称为比色法；利用分光光度计测试，称为分光光度法。 光度分析法特点： (1) 具有较高的灵敏度。 一般物质可测到10-3~10-6 mol?L-1 (2) 有一定的准确度。 相对误差为2%~5% (3) 操作简便、快速，选择性好，仪器设备简单。 (4) 应用广泛。 2 物质对光的选择性吸收 在可见光区(400~760nm)不同波长的光具有不同的颜色。 溶液呈现一定的颜色是对光选择性吸收的结果。当一束白光通过一有色溶液时，某些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过，溶液的颜色由透过光决定。 透射光与吸收光又可组成白光，这两种光称为互补色光。 如CuSO4溶液呈蓝色就是吸收了白光中黄光。 如果将不同波长的光通过一固定浓度和厚度的有色溶液，测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度（吸光度A），然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得一曲线，称吸收曲线。 图中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三条曲线，代表同一被测物质含量由高到低的吸收曲线。 （1）同