色谱分离技术重点.pptVIP

1952年Lapidus等对填充柱色谱过程做了较详细的研究，指出色谱过程中引起组分宽度扩张的因素主要是： 1.沿柱流动方向的纵向扩散效应； 2.组分在两相间的平衡不能瞬时达成，即它在两相交换时传质速度是有限的。 2.4非平衡速率理论 这就是著名的范第姆特方程。也可把Van Deemter方程描述为： 各项分别为：涡流扩散项、分子扩散项（纵向扩散项）、传质阻力项 一些常用色谱分离的介绍 3.1气相色谱 气相色谱法主要利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异，以气体为流动相，以液体或固体为固定相从而达到分离混合物的色谱方法。 待测样品在高温的气化室气化后在惰性气体的带动下进入色谱柱，色谱柱内含有液体或固体固定相 每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的，这种平衡实际上很难建立。 由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附、解吸。 结果是在载气中分配浓度大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大的组分后流出色谱柱，进入检测器。 气相色谱法的特点 优点： 分离效率高、应用范围宽、分析速度快、样品用量少; 灵敏度高、分离和测定一次完成、自动化程度高. 缺点： 不适用于高沸点（450℃）、有生物活性的物质的分离测定 色谱分离技术 概述 01 色谱分离基本原理 02 一些常用色谱分离的介绍 03 CONTENTS 概述 * 1.1色谱法的起源 1903年，俄国植物学家Tsweet将CaCO3固体粉末装入竖立的玻璃管中，从顶端倒入植物色素的石油醚浸出液，并用石油醚连续地冲洗。结果在柱中出现了颜色不同的色带。因此，Tsweet把这种方法称为色谱法。 * 1.2色谱法的发展历程 ◆ 1903年 Tswett创立色谱法（在碳酸钙上分离了叶绿素）。　 由Tswett创立的色谱法分离效率低，分离时间长，根据样品的不同，一般分离需要几小时至几天。 ◆20世纪40年代至50年代初，先后出现了纸色谱（paper chromatography, PC）和薄膜色谱法(thin-layer chromatography,TLC)。 特点：较经典色谱法简单、分离时间短，样品量要求小。 ◆1952年，James和Martin提出了气相色谱法（gas chromatography,GC)特点： 以气体作为流动相。应用范围广泛受到人们重视。但对不易气化和热不稳定性差的化合物难以分离。 ◆ 20世纪60年代后期由于新型色谱柱填料，高压输液泵和高灵敏度的监测器的出现，发展出了高效液相色谱（High performance liquid chromatograghy,HPLC）。 1.3固定相、流动相、色谱柱 在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）称为固定相 ； 自上而下运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ； 装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱 。 1.4什么是色谱法？ 色谱法是一种分离、分析方法，有时又称为层析技术。它利用被分离的诸物质在互不相溶的两相中分配系数等的微小差异进行分离。当两相作相对移动时，使被测物质在两相之间进行反复多次分配，使原来微小的差异累加产生了很大的效果，形成差速迁移，使各组分在柱内移动的同时逐渐分离，以达到分离、分析及测定一些物理化学常数的目的。 两种组分的理化性质原本存在着微小的差异，经过反复多次地吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程使微小差异累积起来，结果使吸附能力弱的组分先流出色谱柱，吸附能力强的组分后流出色谱柱，从而使各个组分得到了分离。 吸附→解吸→再吸附→再解吸 1.5色谱过程 1.6色谱分类 （1）流动相与固定相 聚集态 （2）按操作形式： 柱色谱— 分离体系采用圆柱管 纸上色谱—固定相是滤纸或将固定相载于纸上 薄层色谱—固定相是一层吸附剂物料，平铺于惰性平板上 （3）按分离原理分类： 吸附色谱法：利用吸附剂（固定相一般是固体）表面对不同组分吸附能力的差别进行分离。 分配色谱法：利用不同组分在两相间的分配系数的差别进行分离。 离子交换色谱：利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的不同而进行分离。 凝胶色谱法：利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离。 1.7对复杂混合物各组分进行 定量和定性分析 * 1.8色谱法的特点和优点 1．色谱法的特点： —与经典的分离提纯手段（重结晶，升华，萃取和蒸馏等）相比，色谱法具有快速，简便和高效率等优点。并能对复杂化合物，甚至立体异构体进行分离。 —液相色谱（含柱，薄层色谱）适合于固体物质和具有高蒸汽压的油状物的分离，不适合低沸点液体的分离。