第11章 酶的定向催化课件精品.pptVIP

Directed enzyme evolution 一、自然进化与定向进化 2、定向进化 在实验室中模仿自然进化的关键步骤（突变、重组和筛选），在较短时间内完成漫长的自然进化过程，有效改造蛋白质，使之适于人类的需要。 人为引发、较短时间、人为选择。 3、定向进化的一般过程 4、酶定向进化的意义 酶作为生物催化剂其专一性和高效性是一般催化剂所不能比拟的，但是天然酶的许多性质不适应工业生产的条件。 选择特殊环境，利用酶定向进化技术重新设计及改进酶分子的结构和性质，可以逐步接近和满足将酶催化用于工业生产的需要。 二、酶分子定向进化的历史 在20世纪60年代利用RNA噬菌体Q进行实验，是第一次在分子水平上定向改造单一分子。 1981年，B.G.Hall等定向改变E.coliK12中ebg酶的底物专一性，开发出对几种糖苷键有水解能力的酶。 1993年，Arnold研究组提出易错PCR的方法。 1994年，Stemmer将DNA重组方法引用到酶分子的定向进化中。 1999年，Stemmer等把DNA改组延伸到族改组。 三、酶分子的定向进化 从天然的或人为获得的酶出发，经过基因突变和重组，构建一个人工突变酶库，通过筛选最终获得预先期望的具有某些特性的进化酶。 1、定向进化的过程 （1）通过随机突变和(或)基因体外重组创造基因多样性； （2）导入适当载体后构建突变文库； （3