6-1-6-2植物生理学实验幻灯片.pptVIP

Designed by XK Wang * 实验6-1 脯氨酸含量的测定 一、目的 二、原理 当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中。加入酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520 nm 波长下比色，用回归方程计算出脯氨酸含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1、材料 常温和40℃处理的水稻幼苗。 2、仪器设备 722型分光光度计、大试管、带塞刻度试管、移液管。 3、试剂 2.5%酸性茚三酮溶液、3%磺基水杨酸、冰醋酸、甲苯。 A B 3%磺基水杨酸 5 mL 实验流程 冰醋酸 酸性茚三酮 A B 吸取上清2 mL 分别称取0.5 g 冷却 加4ml甲苯 再次煮沸30min A520 水稻幼苗 A、常温处理 B、40℃处理 处理30 min 沸水浴10 min后，冷却。 各吸取2 mL 各吸取2 mL 四、实验步骤 1、脯氨酸含量的回归方程： A520 = 0.021X－0.028 ( X：Pro含量 ， μg ) 2、准确称取不同处理的水稻幼苗（室温和 40℃处理 30 min）叶片各0.5 g，分别置于大试管中。然后，分 别加入3%磺基水杨酸溶液5 mL，在沸水浴中提取10 min（注意：提取过程中需经常摇动），冷却。 3、