第4章愈伤组织的培养范例.ppt

第四章 愈伤组织培养 一般愈伤组织开始分化时，由大小不等的细胞开始逐渐形成大小均匀的细胞，保持相对稳定状态。在分化时，愈伤组织的表层和内部都可行成分生中心。芽多发生在愈伤组织的表层，属外起源；但根发生在组织的深处，与整体植株发生类似，是内起源。愈伤组织的外部形态也随分化而改变，一般由蔬松转向紧密。 第四章 愈伤组织培养 植物生长调节物质在分化过程中的作用是极为明显的，合适的植物生长物质配比在器官分化中起着重要的作用。大量实验结果表明，大多数植物组织或器官的再生作用符合器官分化的植物激素控制理论，即当生长素与细胞分裂素的比例高时，愈伤组织仅形成根；生长素与细胞分裂素的比例小时则产生苗；而两种激素的比例适中时，则产生无结构的愈伤组织。 胚状体的发生 愈伤组织培养 1．生理因素 在组织培养过程中，逐渐消耗了母体中原有与器官形成有关的特殊物质，而导致继代培养物分化潜力的变化。如胡萝卜组织培养，初代中加入10-6μm的IAA，才能达到最大生长量，但经多次继代培养后，在不加 IAA的培养基上也可达到同样生长量，这说明植物材料内部发生了一些生理生化变化。 不同植物保持分化潜力的时间不同，且差异大。胡萝卜原来培养过程中丧失分化能力的一些组织，加入腺嘌呤、酪蛋白或酵母汁等物质后，器官分化能力可恢复到一定水平。 二、继代培养物的分化潜力 第二节 愈伤组织的继代培养 第四章 愈伤组织培养 2．遗传因素  愈伤组织长期继代培养会引起其细胞内的染色体发生变化，如出现多倍体、非整倍体、染色体丢失、染色体断裂或重组，致使材料变为混倍组织，而且随着继代培养次数和时间的增加，变化频率也随之增加。愈伤组织继代培养物染色体的不稳定性，对保持供体植物的遗传稳定性是不利的。但对育种来讲，往往可以利用这种变化，从中筛选出具有有利经济性状（如高产、优质、抗病）的细胞系，供育成新品种之用。 二、继代培养物的分化潜力 第二节 愈伤组织的继代培养 第四章 在继代培养中通常出现染色体紊乱。尤其是器官发生型，继代培养中分化能力丧失与遗传不稳定有关。所以，在进行继代培养时，要尽量利用侧芽增殖或苗的途径，而诱导不定芽发生或胚的发生，则有一定危险性。  愈伤组织培养 二、继代培养物的分化潜力 第二节 愈伤组织的继代培养 第四章 愈伤组织培养 愈伤组织培养物在某些条件下，可以再分化产生不定芽或根的分生组织甚至是胚壮体，继之，由这些有结构的组织而发育成苗或完整的小植株。愈伤组织通过再分化形成再生植株的方式主要有三种： （1）先产生芽后，在茎的基部长根； （2）先长根，再长芽； （3）愈伤组织的不同部位分别形成根和芽。 第三节 愈伤组织的形态发生 第四章 一 、愈伤组织器官的形成 * 愈伤组织的诱导与分化 愈伤组织的形态发生 愈伤组织培养的应用 愈伤组织的继代培养 复习思考题 愈伤组织培养 第四章 愈伤组织培养 第四章 愈伤组织培养 愈伤组织源出于自然生长的 植物受损伤时，在愈合伤口处长出的一团瘤状突起，瘤状突起内的细胞相对于植物体成熟细胞已发生脱分化的变化。 这一概念后来被引入植物组织培养领域。培养中的愈伤组织是指从外植体的内部或切口表面形成的一团没有分化的组织，这种组织具有再分化的能力。 愈伤组织 第四章 愈伤组织培养 愈伤组织培养将母体植株上的各个部分切下作为外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。 一般情况下，植物组织均能诱发形成愈伤组织。 愈伤组织培养 第四章 第一节 愈伤组织的诱导与分化 愈伤组织培养 一、愈伤组织的诱导 二、愈伤组织细胞的分化 第四章 一、愈伤组织的诱导 愈伤组织培养 植物由细胞构成，细胞是生物结构和生命活动的基本单位，具有全能性，即一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力，或植物细胞具有全套遗传信息，不论是性细胞还是体细胞，在特定环境下能进行表达，而产生一个独立完整的个体。 第一节 愈伤组织的诱导与分化 第四章 一、愈伤组织的诱导 愈伤组织培养 全能性的体现 一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程，然后再经历再分化