答影响革兰氏染色结果的正确性的环节有涂片、固定和脱色。其中最关.pptVIP

四、注意事项：1、选用培养18～24小时菌龄的细菌为宜，若细菌太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。2、加热固定时要使用载玻片夹子，以免烫伤。不要将载玻片在火焰上烧烤时间过长，以免载玻片破裂。3、革兰氏染色成败的关键是脱色时间，如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳性菌。因此必须 严格把握脱色时间。 4、使用染料时注意避免沾到衣物上，乙醇脱色时勿靠近火焰。 * 实验四 革兰氏染色法 一 目的要求： 1、学习并掌握革兰氏染色法。 2、了解革兰氏染色法的原理。 3、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。 二、实验器材： 1.菌种： 大肠杆菌16h牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物、金黄色葡萄球菌16h牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。 2.溶液或试剂： 革兰氏染液，草酸铵结晶紫染液，lugol碘液，95%乙醇，番红复染液等。 3.仪器或其他用品： 酒精灯、载玻片、显微镜、双层瓶、擦镜纸、接种环、试管架，镊子，载玻片夹子，滤纸、滴管和无菌生理盐水等。 三、实验原理： 1、无菌操作技术： 高温对微生物具有致死效应，因为在微生物的转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫死微生物。 2、细菌制片