微生物学实验课件.pptVIP

医学微生物学实验室规则 一.进入实验室必须穿白大衣,不必需的物品不要 携带入室。 二.保持实验室的安静和秩序,实验要严肃认真。 三.如有传染性材料的污染,及时报告老师。 四.实验过程中有仪器和器材的损坏要报告老师 并登记。 五.实验后的材料要放到指定的位置。 六.离开实验室前,要用肥皂洗手,接触过传染性强 的实验材料要用0.1%的新洁尔灭泡手1-2分钟 七.值日生要作好值日工作,关好水,电,门窗,作好 实验记录本的登记方可离开实验室。 目的要求: 1、了解微生物学实验室常用消毒灭菌仪器设备 2、了解空气、皮肤细菌检查方法 3、掌握药品的微生物学检验程序和方法 一.药品的微生物限度检查（一） 1.口服药物的微生物检查: ①大肠杆菌的检查： ②细菌总数的检查 2.外用药物的微生物检查: ①绿脓杆菌的检查： ②金黄色葡萄球菌的检查： 口服药 外用药 将剩余口服药以10-1 10-2 10-3 10-4 进行稀释(以生理盐水稀释) 一、目的要求: 1、了解细菌培养接种技术 2、掌握细菌基本形态 3、掌握药品的微生物学检验程序和方法 二、实验内容 1.药物的微生物限度检查（二） 2.空气、皮肤细菌检查结果测定。 3.讲授基础培养基的制备方法（营养琼脂、营养肉汤）。 4.培养基的种类和用途 普通培养基、营养培养基、厌氧培养基、选择培养基 5.细菌在三种不同物理性状培养基上的接种方法(基本技能) 液体培养基 平板培养基 斜面培养基 双糖含铁半固体斜面培养基 6.显微镜下观察 细菌的基本形态: 球菌、枯草杆菌、霍乱弧菌。 特殊结构： 肺炎荚膜、变形鞭毛、破伤风芽胞。 取出前次实验培养物观察： 1.口服药物 1)细菌鉴定： 在胆盐乳糖增菌液中有无细菌生长： 增菌液变混浊―――――有 -----接种在伊红美兰琼脂平板培养基 上面。 方法：分区划线接种。 2)细菌总数测定： 选择30-300个菌落平板， 细菌总数＝菌落数×稀释倍数 2.外用药 1)判定胆盐乳糖增菌液培养物及亚碲酸钠增菌液培养物有无细菌生长： 增菌液变混浊―――有 2)细菌鉴定： （1）将胆盐乳糖增菌液培养物无菌接种在16烷三甲基溴化胺琼脂斜面培养基上面。 方法：斜面化线接种； （2）将亚碲酸钠增菌液培养物，无菌接种在卵黄高盐琼脂平板培养基上面。 方法：分区划线接种。 37℃恒温孵育箱24小时培养后，观察结果。 一、目的要求: 1、了解细菌的生长现象及代谢产物的观察 2、掌握药品的微生物学检验程序和方法 二、实验内容 1.药物的微生物限度检查（三） 2.细菌的生长现象及代谢产物的观察 1）液体培养基---沉淀、浑浊、表面生长现象。 2）三葡、三链、大肠与副伤乙培养基的菌落特征、溶血环观察。 3）双糖含铁培养基--- 动力、气体、硫化氢、分解乳糖观察。 4）结核杆菌菌落的观察。 3.中草药、抗生素抑菌试验 1）中草药---大蒜汁、黄连、黄芩、黄柏。 2）抗生素---青霉素、庆大、氨苄、新诺明、生理盐水。 1）从伊红美兰琼脂平板培养基上----- 挑取黑色带有金属光泽的湿润菌落，接种在普通琼脂斜面培养基上面，进行细菌的纯培养。 2）观察外用药物在16烷三甲基溴化胺琼脂斜面培养基上生长状况。 记录被检菌色素的溶解性质、液化明胶的状况及菌苔粘稠度等。 革兰氏染色镜下观察其菌落形态。 根据上述被检菌落的生物性质和状况及细菌形态，确定该被检菌的名称。 3）从卵黄高盐琼脂平板培养基上生长，挑取黄色的湿润菌落