细菌拉丝试验（刘海林）幻灯片.pptVIP

应用 主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。大多数革兰阴性菌于5~10s内出现阳性反应，有的则需30~45s，假单胞菌、无色杆菌、黄杆菌、产碱杆菌、莫拉菌等大多数在10s内呈阳性，不动杆菌、莫拉菌反应较慢，大多数菌株在60s内出现阳性，而革兰阳性菌在60s以后仍为阴性。 试验材料 4%KOH溶液，接种棒，载玻片，已培养好的细菌菌落，等。 方法 取1滴40g/L氢氧化钾水溶液（应新鲜配制）于洁净玻片上，取新鲜菌落少许，与氢氧化钾水溶液搅拌混匀，并每隔几秒钟上提接种环，观察能否拉出粘丝。 或用接种环蘸取少量KOH溶液与单个细菌菌落混匀，在平皿中进行拉丝试验，方法同上。 结果 用接种环拉出粘丝者为阳性，仍为混悬液者为阴性。 注意事项 试验一般使用3-5%KOH%较好,常用4%比较方便 。 KOH量不能太多，菌量不能太少，尤其不动杆菌，4%KOH要少一点，菌要多一点，否则易导致阴性。 如果载破片上滴加的KOH液体过多，可将菌落拉到液体较少的边缘进行拉丝试验。 刘海林 拉丝试验原理 革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂，释放出未断裂的DNA螺旋，使氢氧化钾菌悬液呈现粘性，可用接种环搅拌后拉出粘丝来，而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化。 方法1、挑取少量细菌菌落在载玻片上试验阳性结果 方法2、蘸取少量KOH与单个菌落混匀 方法2、拉丝试验阳性 结果