【全程方略】高中生物 专题5课题3 血红蛋白的提取和分离精讲导学课件 新人教版选修1.pptVIP

(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其 在红细胞中的作用体现了蛋白质具有　　　　　功能。 (2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是　　　　　;乙装置中, C溶液的作用是　　　　　 。 (3)甲装置用于　　　　　,目的是______________________ __________________________________________________。 用乙装置分离蛋白质的方法叫________________________, 是根据__________________________分离蛋白质的有效方法。 (4)用乙装置分离血红蛋白时,待______________________时, 用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。 * 【解题关键】(1)理解凝胶柱作用的原理:依据蛋白质分子在其中的移动路径不同导致的不同洗脱顺序来分离不同大小的分子; (2)分析磷酸缓冲液的作用:抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变; (3)掌握蛋白质的分离与提取所用到的方法:离心法和透析法。 * 【解析】(1)血红蛋白能携带氧气,体现了蛋白质具有运输功能。 (2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是磷酸缓冲液;乙装置中,C溶液的作用是洗脱血红蛋白。 (3)甲装置用于透析(粗分离),目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 (4)待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每 5 mL收集一管,连续收集。 * 答案:(1)运输 (2)磷酸缓冲液　洗脱血红蛋白 (3)透析(粗分离)　去除样品中相对分子质量较小的杂质　 凝胶色谱法　相对分子质量的大小 (4)红色的蛋白质接近色谱柱底端 * 【误区警示】(1)在血红蛋白的提取和分离中,缓冲液能维持溶液酸碱度稳定,但缓冲液作用的pH范围有一定限度。 (2)离心过程的主要目的是去除脂质等脂溶性物质,而透析过程主要目的是去除小分子水溶性物质,这两个过程都属于粗分离,洗脱过程是更进一步的分离纯化过程。 * 课题3　血红蛋白的提取和分离 * * 一、蛋白质的提取、分离和鉴定的方法 1.凝胶色谱法——血红蛋白的分离方法: (1)概念:根据_____________的大小分离蛋白质的有效方法,也 称做___________。 相对分子质量 分配色谱法 * (2)原理: ①凝胶 ②分离原理: _________________的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程 _____,移动速度较慢,通过凝胶的时间_____;_____________ _____的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动, 路程_____,移动速度较快,通过凝胶的时间_____。 多孔球体 多糖类化合物 贯穿的通道 相对分子质量较小 较长 较长 相对分子质量 较大 较短 较短 * 2.缓冲溶液: (1)作用:在一定范围内,缓冲溶液能够抵制_____________对溶 液pH的影响,维持pH基本不变。 (2)配制:通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成,调节缓冲 剂的_________就可以制得___________________的缓冲液。 外界的酸和碱 使用比例 在不同pH范围内使用 * 3.电泳——血红蛋白的分离或鉴定方法: (1)概念:带电粒子在_____的作用下发生_____的过程。 (2)原理: ①许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有_________ _____,在一定的pH下,这些基团会带上_____或_____。 ②在电场的作用下,这些带电分子会向着_________________ _______移动。 ③电泳利用了待分离样品中各种分子_______________以及分 子本身的_____、_____的不同,使带电分子产生不同的_____ _____,从而实现样品中各种分子的分离。 电场 迁移 可解离的 基团 正电 负电 与其所带电荷相反 的电极 带电性质的差异 大小 形状 迁移 速度 * 二、蛋白质的提取和分离过程 1.样品处理:血红蛋白由_____肽链组成,包括两条________和 两条________。每条肽链环绕一个___________基团,此基团可 携带_________或_______________。 四条 α-肽链 β-肽链 亚铁血红素 一分子氧 一分子二氧化碳 * (1)红细胞的洗涤: ①目的:___________。 ②方法: 去除杂蛋白 黄色血浆 暗红色 红细胞 五倍体积 生理盐水 * (2)血红蛋白的释放： 蒸馏水 10 * (3)分离血红蛋白溶液: 离心后试管中的溶液分为4层,从