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细胞生物学
细胞生物学:是研究细胞的结构、功能及其生活史的科学。从细胞角度研究生命的发生与分化,发育与生长,遗传与变异,疾病与健康,衰老与死亡等基本生物学规律。
细胞学说内容:1)有机体是由细胞构成的。2)细胞是构成有机体的基本单位。3)新细胞来源于已存在细胞的分裂。施莱登和施旺提出的。
2012年诺贝尔奖由英国生物学家John B.Gurdon和日本生物学家山中伸弥共同获得。他们研究主要针对于“体细胞可以经重编程后转化为可诱导的多能干细胞”领域。
细胞多样性:种类繁多、形态各异、功能多样,形成不同的物种或者构建同一生物体的不同组织。非细胞生命——病毒。细胞生命——原核生物,单细胞真核生物,多细胞真核生物等。
最小的细胞生物:支原体
真核细胞的结构体系:以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统;以核酸(DNA或RNA)和蛋白质为主要成分的遗传信息传递与表达系统;由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。
原核细胞与真核细胞的比较:
与动物细胞相比植物细胞特有的:细胞壁 ,液泡,叶绿体
古细菌:常发现于极端特殊环境中。其形态结构、DNA结构及其基本生命活动方式与原核细胞相似,分子进化特征更接近真核细胞。
光学显微镜(5种):
体式显微镜,解剖镜,放大倍数一般7X-42X,最大180X
普通生物显微镜,用途最广,各种常规染色,免疫组化,原位杂交等结果观察。最大放大2000倍左右。
相差显微镜,观察组织培养中活细胞形态结构的。
倒置显微镜,物镜在下方,便于观察贴附在培养皿底壁上的活细胞
荧光显微镜,用于观察组织中荧光物质。主要应用在免疫细胞化学研究中。
电子显微镜(2种):
透射电子显微镜(TEM):电子书做光源,分辨力0.2nm,放大倍数可达百万倍。观察超微结构(小于0.2μm)
扫描电子显微镜(SEM):用来观察标本表面结构,分辨力6-10nm,有效放大倍率20000X
离心:差速离心(介质密度均一,速度由低到高,逐级离心,用于分离相差悬殊的细胞和细胞器。),
密度梯度离心(速度沉降,密度相近大小不一;等密度沉降,不同密度)。
流式细胞术(FCM):是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选检测手段。一种在也流系统中,快速测定单个细胞活细胞器的生物学性质,并把特定的细胞活细胞器从群体中加以分类收集的技术。
流式细胞仪:分析型流式细胞仪,分选型流式细胞仪。
流式细胞仪读到的参数,荧光信号和散射光信号。
散射光信号:前向散射光(FSC),侧向散射光(SSC)
流式细胞仪作图:单参数直方图,散点图,二维等高图和密度图
原代细胞:从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第一代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中活的具有特殊性质或标志物的培养物。
细胞融合:通过培养和介导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合或细胞杂交。
单克隆抗体(mab):对单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。采用杂交瘤技术制备。
流动镶嵌模型:细胞膜由流动的双脂层和嵌在其中的蛋白质组成。
脂筏模型:是富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域。约70nm左右,是一种动态结构,位于质膜外小页。
膜脂质分子:磷脂、糖脂和固醇。
膜蛋白分子:外周蛋白,整合蛋白,脂锚定蛋白
糖萼:细胞外被,存在于质膜外表面,由多糖与质膜中的蛋白质结合而成。动物表面富含糖类的结构。
血影(ghost):红细胞经低渗处理破裂时放出的内容物,留下一个保持圆形的空壳称谓血影。
四种运输基本方式:
简单扩散:自由扩散,顺浓度梯度(或电化学速度)扩散,不需要提供能量,没有膜蛋白协助。
被动运输:协助扩散,转运速率高,运输速率同物质浓度成非线性关系,具有特异性,具有饱和性。需要载体(离子载体疏水性小分子,可溶于双脂层、通道蛋白跨膜亲水性通道,允许特定离子顺浓度梯度通过,又称离子通道)
主动运输:逆浓度梯度,需要能量,需要载体蛋白。能量来源(ATP驱动的泵通过水解ATP获能,协同运输中的离子梯度动力,光驱动的泵利用光能运输物质细菌)
膜泡运输。
两类膜转运蛋白:载体蛋白:又称作载体,通透酶和转运器。
通道蛋白:能形成亲水的通道,允许特定的溶质通过。
水通道蛋白:又名水孔蛋白,一种位于细胞膜上的蛋白质(内在膜蛋白),在细胞膜上组成“孔道”,控制水在细胞的进出。
钠钾ATP泵 :
原理:对离子的转运循环以来自磷酸化过程,所以叫做P-type离子泵。每个周期转出三个钠离子,转入两个钾离子。
过程:在细胞内侧α亚基与钠离子相结合,促进ATP水解,α亚基上的天冬氨酸残基磷酸化引起α亚基构象发生改变,将钠离子泵出细胞
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