实验六油菜雄性不育性(株)鉴定选择.docVIP

实验六 油菜雄性不育性（株）鉴定选择 一、目的 学习和初步掌握作物雄性不育系的植物学形态特征和花粉育性鉴定技术。 二、内容说明 作物雄性不育系是指雄性器官发育不正常，无花粉或虽有花粉但不具有受精能力，而雌性器官发育正常，能接受外来正常花粉受精结实。当前农作物杂种优势利用方法主要有雄性不育系、雄性不育保持系和雄性不育恢复系三系配套，以及雄性不育系和雄性不育恢复系两系配套。 特点： 一个优良的雄性不育系必须具有不育性稳定，且不育株率和不育度都达到100%，农艺性状好，且整齐一致，柱头外露率高，开花习性良好，以利提高制种产量。在植株形态、花粉育性等方面与正常作物有不同。 四、方法步骤 1.雄性不育系和保持系植株形态特征观察和识别 在不育系繁殖田或杂交制种田对不育系及其保持系（或恢复系）进行逐行逐株观察比较：株型、株高、分蘖、叶色、抽穗开花时间、花药形态、颜色、开裂等情况和开颖角度等形态区别，断定其是否不育系，并选择你认为区分最明显的3-4个性状填入表中，以此证实观察结果。 油菜雄性不育系与雄性不育保持系植株形态比较 性 状 不 育 系 保 持 系 花蕾 瘦小（短缩呈尖细状），色浅 肥大饱满，色深 花瓣 较小，基部较细（花冠短小、花瓣短缩，细窄，呈正常的1/2左右，花瓣基端部突然束细），色浅 大，色深 花药 短小，约为正常的二分之一，顶端无钩，白色 长而肥大，鲜黄色 雌蕊 短，呈短颈瓶状，色浅，有的略弯 长，呈长颈瓶状 （补充内容）玉米雄性不育系与雄性不育保持系植株形态比较 性 状 不 育 系 保 持 系 雄穗 不发达 发达，松散 小穗着生 在主轴上着生稀而扁平 饱满而个体大 颖花开放 关闭，不开放 开放，花丝伸长 花药形态 短小，干瘪 ，浅褐色，不伸出颖片外，不开裂 大而饱满，黄绿色，开花时伸出颖片，开裂散粉 花粉 无花粉或花粉败育，不散粉 花粉量很多，散粉 2.雄性不育系花粉育性镜检鉴定 （自学） 当前生产上利用的雄性不育系多属于核质互作的花粉败育类型。败育花粉经I-KI染色处理，在显微镜下观察，按花粉粒的性状和染色反应分为典型败育、圆形败育和染色败育型。在镜检过程中，为更准确地鉴定各种类型的花粉，将不育系败育花粉的三种类型和正常花粉的特点列表如下： 雄性不育系败育型花粉与正常可育花粉的比较 项目 典败型 圆败型 染败型 正常可育 花粉形状 不规则 圆形 不规则 圆形 碘反应 不染色 不染色或少量浅蓝色 蓝色 蓝黑色 套袋自交结实情况 不结实 不结实 不结实 结实 （1）取样 分别从不育系、保持系（或恢复系）中随机选取即将开花的穗或花序2-4个，挂上标签，带回室内。从中选择花药已伸长达颖壳（或花蕾）2/3的花朵3—4个，剥开内外颖（或花瓣），从每朵花中取花药3个左右作镜检制片。 2）制片 将花药分别置于玻片上，用镊子轻轻捣碎，滴上一小滴I-KI溶液染色，去掉药壁后，盖好玻片，用吸水纸吸去多余的I-KI，待镜检观察。 3）镜检 将制好的玻片，置于100倍显微镜下仔细观察。每片各选择有代表性的视野2—3个观察花粉粒的形状和染色反应，正常花粉因有较多淀粉粒，遇I-KI呈紫黑色，不正常花粉则染色浅或不染色。数计每个视野内不育花粉粒的数量，并计算不育花粉的百分率。 最后根据不育花粉率，判定花粉不育等级。并将取样观察结果列于表中。 不育等级 正常可育 低不育 半不育 高不育 全不育 不育花粉率（%） 50 50—69 70—94 95 100 3. 雄性不育系套袋自交结实性鉴定 套袋自交是鉴定育性最准确、最可靠的方法。即在不育系中选择刚抽穗或尚未开花的花序个，每穗或花序5朵花，套上羊皮纸袋，用回形针固定让其自交结实。15天后取掉纸袋，分别统计其自交结实情况。凡套袋的株（穗）只有一粒结实的就为结实株（穗）。再计算不育株（穗）率和不育度。　%） 10 10—50 50—80 80 100 复习思考题、作业题： 1.完成表格，并对结果进行分析讨论。 2.还有哪些鉴定花粉活力的方法？其优缺点有哪些？ 3.不同农作物雄性不育系最显著的共同特点是什么？ 补充知识： 雄性不育的形态差异 雄性不育植株在外部形态上与同品种的正常株极为相似，但是在开花后，不育株与可育株之间可以从雄花的形态上加以区别： 正常植株的花药都是黄色肥大饱满的，内含很多成熟花粉，花粉粒充实饱满，形状大小一致，数量多，在适宜条件下能够充分开裂并将花粉散出。 而不育株的花药则色浅瘦小干瘪，内无花粉或无正常花粉，或花粉粒畸形皱缩不规则，无内容物，在适宜条件下，花药不能开裂，也无花粉散出。 除了以上花药和花粉的差异外，还有一些其它的异常形式，如花丝畸形、花药退化等。有一些不育基因因与其它基