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ABO血型鉴定 ABO血型鉴定实验原理 抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型 抗体在相邻的红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见的颗粒状凝集团块.见图 IgM抗体凝集红细胞示意图 IgM抗体凝集红细胞示意图 IgGM在盐水介质中产生凝集 试剂 抗A、抗B试剂血清 5%的A型、B型及O型试剂红细胞悬液 受检者血清 5%的受检者红细胞悬液 (从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。)(取少量受检者红细胞（约0.2~0.5 ml）用生理盐水洗涤3次，然后加入适量生理盐水调配成5%浓度。) 四 实验步骤 五 注意事项 玻片、试管都要标记！！！， A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。工作中要形成自己的习惯！ 所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。 红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一侧就不能去接触另一侧。 一般先加血清，然后再加红细胞悬液，便于核实是否漏加血清。 离心时间、速度严格要求，以防假阳 性或假阴性结果。 试验用血清和试剂红细胞都应标准化。 要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，观察后立即记录观察结果。 二 实验原理 ? ? ? ? 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。 见下表 * * 机能实验中心 （三）血型鉴定 1. 玻片法 （1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。 （3） 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型 血清和红细胞悬液 （4）观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。 （5） 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。