ppt课件-福建农林大学分子生物学课件-2.pptVIP

Cloning vectors Cloning vectors plasmids bacteriophages Cosmid BAC,YAC animal and plant viruses baculovirus ,retroviruses 质粒 2-200kb 发现：细菌，偶见于链霉菌和酵母 独立于染色体之外进行复制和遗传,又依赖于宿主编码的酶和蛋白质来进行复制和转录。 比病毒还简单的亚细胞结构，一旦离开寄主细胞则无法繁殖。 Be capable of vectors Replicated and isolated independently of the host’s genome exprsssion vectors: strong promoters selectable marker. 理化因子消除 丫淀橙、EB、利福平、丝裂霉素C、亚硝基胍、高温、紫外线 消除作用不是药物对质粒DNA的破坏，而是对DNA复制的抑制 质粒消除常自发地发生 生物学方法：原生质体形成和再生 理化因子对高度稳定的质粒消除不易奏效 用溶菌酶处理等形成原生质体，再生后菌株便以很高的频率(94%)消除了质粒，如葡萄球菌、枯草杆菌、链霉菌、沙门氏菌等。 消除机制尚不清楚，有人认为去壁形成原生质体时导致了质粒消除,另有认为质粒在原生质体再生过程中丢失的。 质粒载体的设计 双抗生素 蓝白斑