03发酵工艺条件优化.ppt

②温度控制：培养基灭菌后，冷却至培养温度进行发酵，由于随着微生物的增殖和发酵会发热、搅拌产热等，所以为维持温度恒定，须在夹套中以冷却水循环流过。 ③通气、搅拌：空气进入发酵罐前先经空气过滤器除去杂菌，制成无菌空气，而后由罐底部进人，再通过搅拌将空气分散成微小气泡。为了延长气泡滞留时间，可在罐内装挡板产生涡流。搅拌的目的除了溶解氧之外，可使培养液中微生物均匀地分散在发酵罐内，促进热传递，以及为调节pH而使加入的酸和碱均匀分散等。 几种深层培养法 ①放大法 ②两步法 ③控制培养法 ④分批发酵法(间歇发酵法) ⑤连续培养法 ⑥补料分批培养法(流加法) ①放大法： 将微生物在摇瓶基础上逐级放大以实现大规模生产。 在厌气发酵时问题归结为如何从大型发酵罐中除去发酵热。为此考虑到如何利用发酵时生成的二氧化碳引起的液体流动和辅助搅拌，以提高冷却效率，这只需进行发酵罐传热面积的设计即可。 但在好氧培养中，大多以氧的供给为基准进行放大。一般从实验室规模到工厂生产要经过3—5级放大步骤。 放大过程中应考虑： a．氧传递速度相等。 b．比较搅拌桨叶顶端速度。 c．比较单位液量所需的搅拌动力。 d．混合时间相同。 e．雷诺准数相同。 f．通过反馈控制尽量能使重要环境因子一致。 ②两步法 ②两步法：酶制剂生产两步法的特点是将菌体生长条件(营养期)与产酶条件(自我繁殖期)区分开来。菌种先在丰富的培养基上大量繁殖，然后收集菌体浓缩物，洗涤后再转入添加诱导物的产酶培养基，在此期间，菌体积累大量的酶，一般不再繁殖，营养成分或诱导物得到充分利用。 在氨基酸的两步法液体深层培养中，每一步菌种和培养基等均不相同。第一步属有机酸发酵或氨基酸发酵。第二步是在微生物产生的某种酶作用下把第一步的产物转化为所需的氨基酸，这种生产方法又称为酶转化法。 ③控制培养法 了解发酵罐内部的变化情况，掌握短暂时间内状态变量的变化以及可能测定的环境因子对微生物代谢活动的影响，并以此为基础进行控制培养，以达到产物生成的最优培养条件。 用测定状态变量的传感器取得数据，经电子计算机进行综合分析，再将其结果作为反馈调节的信号，将环境(培养条件)控制于给定的基准内。这就叫做电子计算机控制发酵。目前已大量用于露天大罐啤酒发酵。 ④分批发酵法(间歇发酵法) 先将空罐杀菌，培养基装入发酵罐，接种之后进行培养，在培养过程中，培养基成分减少，微生物增殖。微生物周围的环境随时间而变化，是一种非稳态操作法。 此法不易染菌，但很难采用控制基质等浓度的方法来增大发酵生产能力。目前多用在酒精、氨基酸、抗生素生产中。 ⑤连续培养法 在往发酵罐中连续供给新鲜培养基的同时，将含有微生物和产物的培养液，从发酵罐中连续放出，叫做连续培养法。 其特点是能使微生物处于恒定不变的环境中进行长期持续的培养，该系统的稳态被叫做恒化器。同时包含了流入和流出，属开放系统，故变异菌株和杂菌污染随时间的延长而增大。从技术上也很难保证流入和流出速度的一致。 连续培养用于废水处理、葡萄糖酸发酵、酒精发酵等工业中。 ⑥补料分批培养法(流加法) 在分批培养时，不断地供给培养基，但所需产物不到一定时刻不放出的方法，称为补料分批培养法。 用于面包酵母、氨基酸、抗生素等工业。 (4)载体培养 载体培养脱胎于曲法培养，同时又吸收了液体培养的优点，是近年来新发展的一种培养方法。 特征是以天然或人工合成的多孔材料代替麸皮之类的固态基质作为微生物的载体，营养成分可以严格控制，发酵结束，只需将菌体和培养液挤压出来进行抽提，载体又可以重新使用。 载体的取材必须耐蒸汽加热或药物灭菌，多孔结构既有足够的表面积，又能允许空气流通。 3．影响种子培养的条件 菌种扩大培养的关键就是搞好种子罐的扩大培养。 影响种子罐培养的主要因素包括营养条件、培养条件、染菌的控制、种子的级数和接种量控制等 。 泡沫 （1）泡沫的作用： 培养过程中产生的泡沫与微生物的生长和合成酶有关，泡沫的持久存在影响着微生物对氧的吸收； 妨碍二氧化碳的排除，因而破坏其生理代谢的正常进行，不利于发酵； 由于泡沫大量生成，致使培养液的容量一般只能等于种子罐容量的一半左右，大大影响了设备的利用率，甚至发生跑料，招致染菌，造成巨大损失。 （2）产生泡沫的原因 通气和机械搅拌使液体分散和空气窜入，形成气泡； 培养基中某些成分的变化或微生物的代谢活动产生气泡； 培养基中某些成分(如蛋白质及其他胶体物质)的分子，在气泡表面排列形成坚固的薄膜。因此，气泡不易破裂，聚成泡沫层。 （3）培养过程的消泡措施 机械法 化学法。发酵工业常用的消泡剂，有各种天然的动植物油及来自石油化工生产的矿物油、改性油、表面活性剂等。而新型的有机硅聚合物如硅油、硅树脂等，则具有效率高、用量省、无毒性、