第一章染色体结构教材分析.ppt

分 子 生 物 学 主讲教师：郭卫东 电 话E-mail: gwd@zjnu.cn 授课时间：2009-2010学年第一学期 第一节 生命进化系统理论 第二节 染色体的结构 染色体的一般形态结构 着丝粒（centromere） ：是染色体臂DNA的一段特殊的高度重复的序列，该序列不与组蛋白结合，却与其他蛋白结合形成动粒，从而与纺锤体的微管蛋白结合参与有丝分裂后期的染色体移动。 （序列特征p62） 染色体的组成 染色体的结构模型 核小体是染色体包装的基本单位，由组蛋白和DNA组成，其核心是由4种组蛋白（H2A，H2B，H3，H4）各二分子构成的八聚体，其上缠绕146bp核心DNA而组成的。 DNA双螺旋的直径约2nm，核小体的直径约10nm。 染色体包装的支架环模型（scaffold-loop） 染色体的组装： 第三节 DNA的结构 DNA的一级结构 DNA双螺旋结构模型 Watson和Crick提出双螺旋结构模型 DNA双螺旋基本特征： 主链：脱氧核糖与磷酸通过3’ ，5’磷酸二酯键连接成双螺旋的骨架，两条链以反平行的方式围绕同一中心轴互相缠绕形成双螺旋。碱基位于双螺旋内侧。 碱基配对：碱基分子的大小决定了必须是嘧啶与嘌呤配对，氢键的形成决定了必须是A与T，C与G配对。 碱基互补配对的生物学意义：碱基互补配对是DNA复制、转录、反转录、翻译的分子基础，决定了遗传信息的传递。 碱基对的破坏是双链分子发挥功能的关键特征，而形成碱基对的能力是单链核酸发挥功能所必不可少的。 DNA 双螺旋结构的多型性 Z-DNA的发现：A.Rich在分析人工合成的小片段DNA d（CGCGCG）时意外发现其双螺旋是左手螺旋，其磷酸核糖骨架呈Z字型走向，所以称为Z-DNA。在DNA链中只要嘌呤和嘧啶碱交替排列，在一定条件下（如高盐浓度）都有可能出现Z构象。在天然DNA的特殊区域可能存在Z-DNA构象。 Z-DNA的特征：为左手螺旋，磷酸核糖骨架呈Z字型走向。小沟窄而深，并且有更多负电荷，大沟已不存在。 螺旋参数：每圈螺旋12个碱基对，螺旋扭角为 －51°（G-C）和－9°（C-G），螺距为4.6nm，每个碱基对的螺旋上升值为0.35nm（G-C）和0.41nm（C-G），碱基倾角为9°。 研究人员将能够形成Z-DNA的基因序列连接到质粒(plasmid)上，再送到细菌细胞或是人类细胞里。结果发现这些细菌细胞的Z-DNA分子会引发一或二个核酸的剔除或增加，而进到人类细胞里的Z-DNA则会引发较大段序列的删除或重组，或者造成DNA序列的断裂。?? ??????因此，科学家怀疑这个Z-DNA分子是细胞自己产生的突变剂(mutagen)，当然也是细胞演化与多样性不可缺乏的条件。如果这个假说是正确的，那些找不到原因的疾病发生很可能就有了进一步深入研究的重要线索。 维持DNA双螺旋结构的因素 DNA的超螺旋结构 DNA高级结构的主要形式是超螺旋结构。 DNA超螺旋结构可分为正超螺旋和负超螺旋，两者可以在特殊条件下相互转化。 第四节 DNA的特性 变性： DNA双螺旋区的氢键断裂，使双螺旋的两条链完全分开变成单链，链分离的过程叫做变性(denaturation)或熔解(melting)。 DNA的熔点或熔解温度：通常把DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度，用Tm表示。在适宜的生理条件下，DNA的Tm值一般在85-95℃之间，所以在细胞状态下，双螺旋DNA是稳定的结构。 DNA的熔解曲线(melting curve)：以温度为横坐标，以光吸收值为纵坐标，可以得到DNA的熔解曲线(melting curve)。曲线常常表现为相同的形状，但在温度坐标上的绝对位置（Tm）却受 DNA的碱基组成和变性环境的影响。 影响 DNA Tm值的因素 复性：变性DNA在适当条件下，两条彼此分开的链又可重新形成氢键，缔合成为双螺旋结构，这个过程叫做复性(renaturation) 。 影响复性的因素 复性温度：温度是影响复性重要因素。温度高复性困难。但是，低温减少了互补链碰撞的机会，而且解开已经误配的片段以寻找正确的互补链，在低温下也很困难。因此复性温度不能过低，一般比熔点低25℃左右是最佳温度。 杂交：不同来源的两个互补核酸序列也能通过相互退火形成双螺旋结构，这样的反应称为杂交(hybridization)。 DNA分子的呼吸作用： 在DNA分子的双螺旋结构中，配对碱基之间的氢键处于连续不断的断裂和再生的动态平衡中，这种现象称为DNA链的呼吸作用。特别是富含A/T的区域，呼吸作用更强。这对于DNA的复制和转录起始具有重要作用。 第五节