第五章细菌和噬菌体遗传教材分析.ppt

流产转导（abortive transduction） 普遍性转导中，在基本培养基上除了出现正常菌落之外，还有大量小菌落，两者之比约为1:10，这一现象称为流产转导。 导入受体的野生型基因只有大约10%可以重组到受体染色体，形成完全转导 90%的未重组片段因不能复制而在细胞分裂时只能传递到一个细胞中，称为单线遗传。 未得到供体基因的细胞依靠母细胞残留的酶可以分裂一两次，形成小菌落。 普遍性转导中约0.3%噬菌体为转导噬菌体，而包装DNA量约为沙门氏菌染色体的1%，任意基因的转导频率约为3×10-5 普遍性转导中，受限于噬菌体头部DNA的包装量，两基因之间距离大于噬菌体染色体长度时通常不能同时转导，两个基因始终一起转导或同时转导频率较高时即证明两个基因是连锁的。这种两个基因同时转导的现象称为共转导或并发转导（co-transduction） 利用共转导可以进行细菌染色体基因作图，两基因共转导频率越高则连锁越紧密 共转导 例： 转导噬菌体P1侵染大肠杆菌(supC+trpA+pyrF+)释放后再侵染另一大肠杆菌菌株(supC-trpA-pyrF-)，以supC为选择标记得如下结果： 1. supC+trpA+pyrF+：36 2. supC+trpA+pyrF-：114 3. supC+trpA-pyrF+：0 4. supC+trpA-pyrF-：453 确定C、A、F三基因的排列顺序 C—F—A 、A—C—F还是C—A—F？ 特异性转导（restricted transduction） 特异性转导： 也称局限性转导，通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中进行遗传重组的现象 温和噬菌体λ也是一种附加体 由于包装DNA长度限制，含有细菌DNA的转导颗粒必然缺少一段噬菌体自身DNA，因此这种转导噬菌体是一种缺陷噬菌体，用λdgal+表示。 特异性转导颗粒形成的转导子大部分都是不稳定的转导子，只有少数可以形成稳定的转导子，这是由于gal位点上发生了重组导致的 λdgal+进入受体后通过配对交换插入受体染色体，形成gal+/gal-转导子。att位点中通常有与λdgal+同时进入的λ插入。该转导子是不稳定的转导子，会不断有λdgal+解离下来，由于λd不能复制而在细胞分裂中丢失，导致不断有gal-分离子出现。 本章小结 F-菌株、F+菌株、Hfr菌株； F因子、Hfr、F′因子的异同；附加体 部分二倍体 转化、接合、性导与转导的概念与基本原理； 原噬菌体、溶源菌、溶源免疫 合子诱导 细菌遗传作图的原理和基本过程。 用一种大肠杆菌的不同Hfr菌株进行中断杂交实验，作出连锁图，其基因向F-细胞转移的顺序不同 转移的顺序是不是随机的？比如：thr thi gly 大肠杆菌K12菌株部分遗传图，整个环状基因组约100min 重组作图 两基因转移时间间距小于2min时，中断杂交法的图距不够精确，应采用重组值测定 Hfr（lac+ade+strs）×F- (lac-ade-strr) 已知ade+在lac+之后进入F- 将两型细菌混合互作60min，在含str无ade的选择培养基上筛选ade+菌株，菌落克隆影印至伊红美蓝培养基确定其乳糖基因型，计算lac与ade的重组值 例：两个紧密连锁基因： lac-（乳糖不发酵）ade-（腺嘌呤缺陷型） 粉红色菌落：lac- 紫红色菌落：lac+ 52 15 Rf(ade-lac)= lac-ade+ lac-ade++lac+ade+ = 15 15+52 ×100% =22% 1min大约相当于20%重组值 大肠杆菌染色体全长100min，约2000cM，1cM=2000bp F′ ：Hfr菌株的F因子不正常环出，可能会包含部分细菌的染色体片段，称为F′因子 F′ ×F- 能使F-变成F′，细菌的遗传重组频率很高 Hfr F′ 性导（sexduction）：利用F′因子将供体细胞基因导入受体形成部分二倍体的过程称为性导 F-菌株：缺乏F因子 F+菌株：具有游离的F因子 Hfr菌株：F因子整合到宿主染色体上 F′菌株：含带有部分宿主染色体的游离F因子 三种致育因子的关系 F+×F-：能使F-变成F+，细菌的遗传重组频率很低 Hfr×F-:不能使F-变成F+，细菌的遗传重组频率很高 F′×F-:能使F-变成F′, 所携带细菌基因的遗传重组频率很高 烈性噬菌体（virulent phage） 侵入宿主细胞后，利用宿主细胞内的物质进行自身遗传物质和蛋白质的合成，组装出子噬菌体，使宿主细胞裂解而释放子噬菌体，这类噬菌体称为烈性噬菌体。T系列噬菌体 第三节 噬菌体的遗传分析 烈性噬菌体侵染过程 温和噬菌体（temperate phage）： 侵入后并不使细菌裂解，而是以原噬菌体或质粒的形式