DNA重组技术的基本工具导学提纲(一).docVIP

题目： 专题1 1.2 基因工程的基本操作程序（一） 班级： 姓名： 小组： 学习目标： 1．获取目的基因的方法 2．基因表达载体的组成及各自作用 3．将目的基因导入植物细胞、动物细胞、微生物细胞的常用方法 学习重点与难点： 1．基因文库 2．农杆菌转化法的原理 3．目的基因的检测与鉴定的步骤 导学过程 深化预学 一、基因工程的基本操作程序 1．____________的获取。2．________________的构建。 3．将目的基因导入____________。4．目的基因的________与鉴定。 真核细胞基因的编码区是间隔的、不连续的。 真核生物基因的结构特点是：“编码区是间隔的、不连续的。”也就是说：能够编码蛋白质的序列被不能编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式。其中，能够编码蛋白质的序列叫外显子，不能编码蛋白质的序列叫内含子。 真核基因包括编码区和非编码区，编码区又分为外显子和内含子, 在遗传学上通常将能编码蛋白质的基因称为结构基因。真核生物的结构基因是断裂的基因。一个断裂基因能够含有若干段编码序列，这些可以编码的序列称为外显子。在两个外显子之间被一段不编码的间隔序列隔开，这些间隔序列称为内含子。内含子（Intervening regionDNA片断，它分开相邻的外显子。更精确的定义是：内含子是阻断基因线性表达的序列。DNA上的内含子会被转录到前体RNA中，但RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行转译前被剪除。在成熟mRNA被保留下来的基因部分被称为外显子。真核生物的基因含有外显子和内含子，是前者区别原核生物的特征之一。 三、目的基因的获取 1．目的基因：主要是指编码蛋白质的________，也可以是一些具有________________。 2．基因文库 (1)基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多________，导入________的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 3．获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因 (2)利用PCR技术扩增目的基因 ①PCR的含义：是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。 ②过程：目的基因受热形成__________，与________结合，在________的作用下延伸形成DNA。 ③方式：指数扩增＝2n(n为扩增循环的次数)。 (3)人工合成法：若________较小，________序列已知，可以人工合成。 迁移运用 1、关于内含子和外显子的说法正确的是 （ ） A .内含子和外显子在转录的过程中都能够转录成成熟的mRNAB.只有外显子能够转录成mRNA，tRNA，rRNAC.原核细胞基因中也有内含子和外显子D.由于内含子不能编码蛋白质，故它属于非编码区 2、 2011海南31.[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分） 回答有关基因工程的问题： （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生____________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_______________（相同，不同）粘性末端的限制酶。 （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_____________________________________________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为__________________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成_______________，常用抗原-抗体杂交技术。 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______上。 学后反思 参考答案：例题1：B 例题2：（1）?平。相同。 （2）?提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录。 Ca2+， DNA—RNA分子杂交。胰岛素原（蛋白质）。 T—DNA， 染色体。 吕梁市高级中学课堂导学提纲 编号：SWDXTG—选修3-02 使用时间 3月21日 编制 冯丽芳