IL10论文NKT细胞对C57BL6小鼠胚胎着床和发育的影响及其免疫机制的初步研究.docVIP

IL-10论文：NKT细胞对C57BL/6小鼠胚胎着床和发育的影响及其免疫机制的初步研究 【中文摘要】为了探究NKT细胞对C57BL/6小鼠胚胎着床和发育的影响及其可能的免疫机制,通过刺激NKT细胞增殖活化,观察胚胎着床及发育情况,同时检测其分泌的细胞因子IL-10和TNF-α变化,以分析其在母体子宫内膜免疫微环境中的调节作用。方法：1、在小鼠胚胎着床前后的不同时间腹腔注射不同浓度的抗原KRN7000刺激NKT细胞活化,整体观察胚胎着床和发育情况。2、在小鼠胚胎着床前后的不同时间腹腔注射不同浓度的抗原KRN7000刺激NKT细胞活化,用RT-PCR法半定量检测NKT细胞活化后子宫蜕膜组织中IL-10和TNF-αmRNA的表达量。结果：1、分别给妊娠D3(着床前一天)和妊娠D6(着床后)小鼠腹腔注射不同浓度(0,1.25,2.5,5μg/ml)的抗原KRN7000每只0.4m1,于妊娠D8观察着床胚胎数及其发育情况,结果显示于妊娠D3给药后,各实验组胚胎着床数减少,与对照组相比存在显著差异(P0.05)。于妊娠D6给药后,各实验组均诱导胚胎流产,胚胎吸收率均达100%。2、分别给妊娠D3和妊娠D6小鼠腹腔注射不同浓度(0,1.25,2.5,5μg/ml)的抗原KRN7000每只0.4m1,用RT-PCR技术检测给药后一天不同实验组子宫蜕膜组织中IL-10的mRNA表达。结果显示妊娠D4(着床日)小鼠中,各实验组子宫蜕膜组织中IL-10的mRNA表达均明显低于对照组,差异有显著性(P0.05)。妊娠D7天小鼠中,各实验组子宫蜕膜组织中IL-10的mRNA表达也明显低于对照组,差异有显著性(P0.05)。3、分别给妊娠D3和妊娠D6小鼠腹腔注射不同浓度(0,1.25,2.5,5μg/ml)的抗原KRN7000每只0.4ml,用RT-PCR技术检测给药后一天不同实验组子宫蜕膜组织中TNF-α的mRNA表达。结果显示妊娠D4,实验组各组中TNF-α的mRNA表达明显低于对照组,差异有显著性(P0.05)；妊娠D7小鼠中,各实验组TNF-α的mRNA表达高于对照组,但1.25μg/ml和2.5μg/ml浓度组与对照组比较差异有显著性(P0.05)。4、通过分析妊娠D4和妊娠D7小鼠的子宫蜕膜TNF-α/IL-10的相对光密度比值,结果显示在妊娠D4小鼠中各实验组TNF-α/IL-10的相对光密度比值高于对照组,1.25μg/ml和5μg/ml浓度组与对照组比较差异有显著性(P0.05),5μg/ml浓度组比值高于其他三组,差异具有显著性(P0.05)。结论：1、在胚胎着床前激活NKT细胞可使着床胚胎数减少和胚胎发育不良；在着床后激活NKT细胞则可促使胚胎流产。2、着床后子宫蜕膜中TNF-α的过量表达将影响胚胎发育,促使胚胎流产。3、在胚胎着床前后,子宫内膜中活化的NKT细胞使Thl/Th2 (TNF-α/IL-10)的比值向Thl漂移,不利于子宫内膜局部形成免疫耐受的微环境,从而影响胚胎着床和妊娠维持。 【英文摘要】:To study NKT cell affecting embryo of C57BL/6 mice implantation and development, NKT cell is activated by antigen KRN7000,then we check some secreted cytokines(IL-10 and TNF-α)and analyze that they regulate the immune balance in maternal endometrium.Methods:1、After intraperitoneal injection of different concentrations of KRN7000 on different pregnancy time, the groups were observed embryo number and embryo development;2、After intraperitoneal injection of different concentrations of KRN7000 on different pregnancy time, the groups measured the expression of IL-10, TNF-a mRNA in uterine decidua by RT-PCR.Results:1、Intraperitoneal injection of different concentrations of antigen KRN7000 on the D3 and D6 of pregnancy