肝功能检查指标的选择与评价课件.pptVIP

肝功能检查指标的选择与评价 一、实验目的 掌握：血清转氨酶、胆红素测定的方法和原理； 熟悉：重氮试剂法测定血清胆红素的操作步骤； 了解：血清转氨酶、胆红素测定的临床意义。 ALT、AST测定 测定方法：连续监测法、赖氏法 连续监测法测定丙氨酸氨基转移酶基本原理： L-丙氨酸+α-酮戊二酸 α-丙酮酸+L-谷氨酸 α-丙酮酸+NADH 乳酸+NAD+ 连续监测法测定天门冬氨酸氨基转移酶基本原理： L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸 草酰乙酸+L-谷氨酸 草酰乙酸+NADH+H+ L-苹果酸+NAD+ 连续监测法测定NADH被氧化为NAD+,可在340nm处连续监测到NADH被氧化引起吸光度下降速率，该下降速率与ALT、AST活性呈正比。 二实验原理 ALT LDH AST MDH 三、试剂与器材 丙氨酸氨基转移酶试剂盒： R1: α-酮戊二酸、NADH、乳酸脱氢酶（LDH） R2：L-丙氨酸 、Tris缓冲液 天冬氨酸氨基转移酶试剂盒： R1: α-酮戊二酸、NADH、苹果酸脱氢酶（MDH）、 乳酸脱氢酶（LDH） R2：L-天门冬氨酸 、Tris缓冲液 四、操作步骤 1.试剂准备：取 10ml的R2，溶解一瓶R1，充分溶解后