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p53基因调控研究的新进展 朱荻绮 陈 敏 审阅 李 稻 上海第二医科大学病理生理学教研室 200025 摘要 p53作为抑癌基因，其激活与调控机制的研究是近年的热点。DNA受损等应激信号可活化p53，诱导细胞周期调控和细胞凋亡为主的多种细胞学反应，而MDM2、YY1等作为p53的负反馈调控因子，控制p53过度活化。近来发现，p53可上调p21基因表达产物p21WAF1蛋白使细胞周期阻滞于G1期；同时，激活GADD45参与对G2的阻滞；亦可通过caspasee介导的ERK2/MAPK的细胞裂解通路抑制细胞增殖。另外，p53通过BH3-only蛋白激活Bax、正调控puma和noxa、抑制Bcl-2等多种途径共同诱导细胞凋亡，p53家族成员p63和p73也参与p53诱导的凋亡过程。 关键词 细胞周期；凋亡；p53；p21；Bcl-2；MDM2 p53 属于抑癌基因位于染色体17p13.1，基因全长16~20kb，含11个外显子，2~11外显子编码分子量为53kD的53核内磷酸化蛋白。正常野生型53活化后可诱导多种细胞生物学行为，如调控细胞周期、诱导细胞凋亡、细胞分化、细胞衰老、DNA修复，以及抑制血管生成等。在细胞周期中，蛋白通过阻止G1期细胞进入S期，使损的DNA或染色体有时间得以修复若DNA或染色体损伤严重时，53能触发凋亡机制除损的细胞53基因调控 p53基因受多种信号因子的调控，其中较为重要的负反馈调控因子是MDM2。MDM2是一种对p53特效的E3泛素连接酶，为原癌基因mdm2的基因产物。mdm2是一种进化的保守基因，具有转录因子功能，其编码的基因产物能与p53 结合，使p53介导的反式激活、抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用受抑制，解除细胞G1期的阻滞并重新进入细胞周期[1]。研究表明， 尽管p53蛋白只在核内发挥作用，但其从核内向外移出可能依赖MDM2途径的调控。p53蛋白的出核是决定其降解的关键。MDM2与p53蛋白结合构成寡二聚体复合物，mdm2过度表达时，通过与p53 蛋白酸性活化区直接结合可抑制p53的转录活性。由于MDM2的水平受到p53(wt)调控，因而，在MDM2与p53之间形成负调节反馈环，以保持MDM2与p53蛋白之间比率的恒定 。DNA损伤可使p53蛋白的多个部位发生磷酸化，包括与MDM2结合的部位，从而阻止MDM2与p53蛋白的结合。此外，MDM2还能与核糖体蛋白L5、L11和L23结合，所以细胞内至少存在两种MDM2-核糖体蛋白复合物：MDM2-L5-L11-L2和p53-MDM2-L5-L11- L23，其中MDM2-L5-L11-L23复合物能抑制p53的活化[2]。但是，L11和L23都被证实能抑制MDM2对p53蛋白的降解作用，进而增强p53表达。L5的过表达能稳定H1299细胞中的异位p53；以及稳定U2OS细胞中内生的p53，因此，L5能提高p53的转录活性并且诱导p53依赖的细胞G1期的阻滞。与L11和L23一样，L5能显著地抑制MDM2对p53蛋白的降解作用。 转录因子Yin Yang1（YY1）是肿瘤抑制基因p53的另一调控因子。YY1与p53相互影响，通过抑制p53与其共活化物p300的相互作用，控制p53的转录活性和乙酰化，并且破坏p53的稳定性。再者，YY1也能与MDM2基因的相互作用，MDM2表达的增强促进了p53-MDM2复合物的装配 [3]。 肿瘤抑制基因INK4aARF编码蛋白p19ARF（半衰期约为6小时）是抑癌基因p53的激活因子。它通过与MDM2、E3 蛋白连接酶结合来活化p53，并通过抑制MDM2来提高p53蛋白的功能稳定性，调节细胞功能，但是这些分子并不控制p19ARF翻折，相反，一种能与p19ARF结合的核仁蛋白nucleophosmin/B23能延缓它的翻折。突变的p19ARF不能有效地与nucleophosmin/B23结合，因而是不稳定的，并且功能减弱[4]。细胞受损后，内生的p19ARF蛋白与MDM2形成沉淀物停留在细胞核内，这一过程在缺乏功能性p53的细胞中是不存在的[5]。 2．p53蛋白对细胞周期的调控 研究中发现，在哺乳动物中，如果细胞的DNA受损或者遭受到其它类型的损伤时，p53蛋白能够阻止其细胞周期从G1进入S期。另外，p53蛋白也能通过结合转录因子E2F，使E2F不能够结合到一些原癌基因（例如c-myc，c-fos）的启动子上，实现对细胞周期的阻滞。这表明p53蛋白在某些细胞的增殖周期调控过程中起关键作用。p53蛋白在正常机体生长和发育过程中似乎未发挥十分重要的作用，敲除p53的小鼠仍可产生相当正常的后代。但是由于p53的缺失，使得基因损伤不断积聚，机体无法控制异变细胞的生长，最终导致机体的