《临床免疫学和免疫检验》实验教学大纲.docVIP

《临床免疫学和免疫学检验》实验教学大纲 （供五年制本科医学检验专业使用） Ⅰ 前 言 本大纲供五年制本科医学检验专业学生使用。编写本大纲的目的是要求学生通过实验课的学习验证理论，使学到的知识更为巩固，通过学习亲自动手操作。现将大纲使用中有关问题说明如下： 一 为使学生和教师更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成，便于学生重点学习。 二 教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。 三 参考学时为44学时。 四 使用教材：《临床免疫学和免疫检验实验指导》，人民卫生出版社，刘辉，2版，2003年。 Ⅱ 正文 实验一 抗体的制备（综合性实验） 一 教学目的 通过制备抗伤寒沙门菌抗血清，熟悉多克隆抗体的制备流程及抗血清的鉴定方法。 二 教学要求 （一）掌握抗体产生的原理。 （二）熟悉制备多克隆抗体的实验设计 （三）了解抗血清的分离和保存 三 教学内容 （一）免疫原（抗原）的纯化和制备。 （二）实验动物的选择条件。 （三）免疫方案的设计。 （四）动物采血和分离血清。 （五）抗血清效价滴测定定（试管法凝集试验）。 实验二 单向免疫扩散试验 一 教学目的 学习单向免疫扩散实验的实验原理、试剂与器材及操作方法。 二 教学要求 （一）掌握单向免疫扩散实验的实验原理、试剂与器材及操作方法。 （二）熟悉单向免疫扩散试验的结果判断。 （三）了解实验注意事项及方法学评价。 三 教学内容 （一）单向免疫扩散试验的测定免疫球蛋白的原理、方法及结果判断。 （二）单向免疫扩散试验的测定免疫球蛋白影响因素。 实验三 胶乳凝集试验 一 教学目的 学习类风湿因子（RF）测定的原理、方法及结果判断。 二 教学要求 （一）掌握胶乳凝集试验的原理、方法及结果判断。 （二）熟悉胶乳凝集抑制试验。 （三）了解胶乳凝集抑制试验检测绒毛膜促性腺激素（HCG）的实验原理、试剂与器材、操作方法及结果判断。 三 教学内容 （一）胶乳凝集试验检测类风湿因子原理。 （二）非特异反应的判断和排除。 实验四 酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原 一 教学目的 学习酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的原理、试剂组成与所需器材、操作方法、结果判断。 二 教学要求 （一）掌握酶联免疫吸附试验的原理、试剂与器材、操作步骤。 （二）熟悉酶标免疫定量测定。 （三）了解酶免疫组化技术，酶标记抗体的制备。 三 教学内容 （一）酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。的原理、试剂与仪器操作、结果判断。临界值的确定原则。 （二）方法学评价：一步法和二步法的比较，钩状效应（hook effect）即带现象（zone phenomenon）的判断和克服办法。 实验五 免疫荧光显微技术检测抗核抗体 一 教学目的 学习免疫荧光显微技术检测抗核抗体。鼠肝印片的制作。斑点金免疫渗滤试验检测抗DNA抗体。 二 教学要求 （一）掌握免疫荧光技术的原理、试剂与器材（抗原片的选择和制备：肝印片、HEP-2细胞印片），操作方法、结果判断。 （二）熟悉抗核抗体阳性细胞核型分析。斑点金免疫渗滤试验。斑点免疫层析试验。 （三）了解免疫标记技术的发展趋势。 三 教学内容 （一）免疫荧光显微技术检测抗核抗体，鼠肝印片的制作。 （二）斑点金免疫渗滤试验（dot immunogold filtration assay，DIGFA）检测抗DNA抗体。 实验六 单个核细胞的分离 一 教学目的 学习密度梯度离心法分离单个核细胞的原理、试剂与方法、结果判断。外周血单个核细胞分离及活细胞计数。 二 教学要求 （一）掌握单个核细胞分离的方法评价和临床意义。 （二）熟悉单个核细胞分离的注意事项。 （三）了解淋巴细胞E受体检测，淋巴细胞转化试验，NK细胞功能检测。 三 教学内容 （一）密度梯度离心法分离单个核细胞的原理。 （二）外周血单个核细胞分离及活细胞计数的试剂与方法、结果判断。 实验七 淋巴细胞E受体检测 一 教学目的 E受体为人类T细胞的重要标志，通过淋巴细胞E受体的检测，既能计数T细胞的量，又能反映T细胞的活性，从而了解机体细胞的免疫水平。 二 教学要求 （一）掌握：淋巴细胞E受体的临床意义。 （二）熟悉T淋巴细胞E花环的操作。 三 教学内容 （一）淋巴细胞E受体检测实验原理、试剂与器材。 （二）淋巴细胞E受体检测的操作方法、注意事项、方法评价及临床意义。 实验八 免疫印迹法检测-ENA抗体 一 教学目的 学习免疫印迹技术的概念、实验原理、试剂与器材、结果判别及注意事项。 二 教学要求 （一）掌握免疫印迹技术的概念、实验原理、试剂与器材及注意事项。