TALEN靶向基因敲除技术.docVIP

TALEN靶向基因敲除 TALENs(transcription activator-like (TAL) effector nucleases)，中文名是转录激活因子样效应物核酸酶，TALENs是一种可靶向修饰特异DNA序列的酶，它借助于一种由植物分泌的天然蛋白生成了TALENs。TAL效应核酸酶可与DNA结合并在特异位点对DNA链进行切割，从而。 TALEN 靶向基因敲除技术是一种崭新的分子生物学工具，现已应用于植物、细胞、酵母、斑马鱼及大、小鼠等各类研究对象。研究发现，Xanthomonas TAL蛋白核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有较恒定的对应关系。研究者们利用来自Xanthomonas TAL的序列模块，构建针对任意核酸靶序列的重组核酸酶，在特异的位点打断目标基因，敲除该基因功能。成功解决了常规的ZFN方法不能识别任意目标基因序列，以及识别序列经常受上下游序列影响识别特性的问题，使基因敲除变得简单方便。 技术特点：·无基因序列、细胞、物种限制。·实验周期短。·整个实验简单准确，成本低。·成功率可达90%以上。·毒性低、脱靶情况少。·TAL的核酸识别单元与A、G、C、T有恒定的对应关系。·靶序列识别模块不受上下游影响，特异识别并打断基因组中的任意靶序列。·成对的TAL识别模块保证了基因敲除靶点的准确性。·已经成功应用到了植物、细胞、酵母、斑马