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* * Journal of immunological method A method for isolating and analyzing human mRNA from newborn stool 2009，V349 2011,08,24 徐振杰 1. Introduction 1. 人类转录组对于人类健康和疾病的研究很有价值； 2. 目前的研究仅限于血液、尿液和软组织； 3. 对于粪便等中的转录子的研究也仅限于成人消化道肿瘤的检测； 4. 目前用于分离人类粪便RNA的方法和试剂未能商业化或者未能去除PCR抑制因子。 本研究发展了Kang的方法，报道了样品间和个体间的mRNA的差异。 2. Materials and Methods 三个婴儿，分别是怀孕27周、27周、29周出生的婴儿，收集其新鲜粪便。三步法提取RNA:玻璃珠法+苯酚-氯仿抽提+硅胶柱纯化。 阳性对照组：成人血液白细胞和E.coli，用试剂盒方法提取总RNA。 总RNA得率：分光光度法，表示为RNA的质量/粪便样品的质量；RNA完整性（RIN）用Agilent 5200 Bioanalyzer分析。 逆转录定量PCR：分别用引物扩增IL-6，IL-8，S100A8（钙网蛋白的一个亚基），EGF(表皮生长因子)和GAPDH（管家基因，用于内参）。 PCR抑制因子的检测：用本文方法及其他三种方法提取新生儿粪