1.1-DNA重组技术的基本工具题库.pptVIP

基因工程 1.概念：基因工程是指按照____的愿望，进行 严格的设计，并通过体外_____重组和基因拼接 等技术，赋予生物新的________，从而创造出 更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 人们 DNA 遗传特性 DNA重组技术 基因拼接技术 2.原理：__________ 基因重组 4.别名：___________或____________ 3.操作水平：__________ DNA分子水平 要是我自己能对付害虫就好了！ 普通棉花 　　抗虫棉 基因工程培育抗虫棉的简要过程 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌（有抗虫性状） 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 重组DNA 导入 形成 培育抗虫棉的关键步骤有哪些？ 1.1 DNA重组技术的基本工具 三种基本工具 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？ 一、限制性核酸内切酶 （限制酶） 课本P4—寻根问底 来源 主要是从原核生物中分离纯化出来的 一、限制性核酸内切酶 作用 识别特定的核苷酸序列，使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 （限制酶） A G 一种限制酶是否能断开任何一处磷酸二酯键？ 一、限制性核酸内切酶 EcoRⅠ （限制酶） EcoRⅠ限制酶识别： GAATTC序列 一、限制性核酸内切酶 SmaⅠ 限制酶具有专一性 （限制酶） SmaⅠ限制酶识别： GGGCCC序列 中轴线 中轴线 平末端和黏性末端 SmaⅠ EcoRⅠ 平末端　　　　 黏性末端　　　　 A生物的DNA片段 EcoRⅠ DNA连接酶 B生物的DNA片段 EcoRⅠ 黏性末端 黏性末端 黏性末端 黏性末端 作用 催化 　　的形成将两条DNA链连接起来 种类 （1）E·coli DNA连接酶 （2）T4DNA连接酶 二、DNA连接酶 磷酸二酯键 E·coli DNA连接酶或T4DNA连接酶可以 连接互补的黏性末端 T4 DNA连接酶还可以连接平末端 　 ，但效率较低 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ 寻根问底 A G T A C T A A T DNA 母链 DAN聚合酶 DNA聚合酶 寻根问底 T T A G A T A T C C G A C G G T T T A A … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … DNA连接酶 寻根问底 思考 DNA连接酶是将___________连接起来 DNA聚合酶是将___________连接起来 共同点：都是催化磷酸二酯键的形成 两个DNA片段 单个核苷酸 三、基因进入受体细胞的载体 质粒 大肠杆菌细胞 小型环状DNA分子 质粒的特点： 假如质粒没有限制酶切割位点将怎样？ （没有限制酶能识别的序列） 质粒 限制酶 ？ 限制酶 ？ 限制酶 ？ 限制酶 ？ 目的基因 1.有一个或多个酶切割位点 目的基因 插入位点 质粒的特点： 1.有一个或多个酶切割位点 重组DNA 受体细胞 受体细胞 假如质粒含有标记基因如：四环素抗性基因 含四环素的培养基 2.具有标记基因（四环素抗性基因、氨苄基青霉素抗性基因等） 质粒的特点： 1.有一个或多个酶切割位点 2.具有标记基因（四环素抗性基因、氨苄基青霉素抗性基因等） 受体细胞 3.能自我复制 有酶切割位点 标记基因 能自我复制 大肠杆菌质粒 对受体细胞无害 质粒的特点： 1.有一个或多个酶切割位点 2.具有标记基因（四环素抗性基因、氨苄基青霉素抗性基因等） 3.能自我复制 4.对受体细胞无害 细菌质粒 用EcoRⅠ限制酶 切割出来的 抗虫基因 用同一种限制酶打开质粒 用DNA连接酶连接 重组DNA 抗虫棉 棉花细胞 1.1 DNA重组技术的基本工具 三种基本工具 限制酶 DNA 连接酶 载体 动动手 步骤1：制作两个DNA分子片段 步骤2：用E.coRⅠ限制酶分别切割两个DNA分子片段 步骤3：将不同颜色的片段连接起来形成重组DNA分子 课堂练习（一） 1.以下说法正确的是 A．所有的限制酶只能识别同一种特定的 核苷酸序列B．质粒是基因工程中惟一的运载体 D．DNA连接酶的作用是催化碱基间氢键的形成 C．运载体必须具备的条件之一是：具有一个或 多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接 课堂练习（二） 2.如图，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶催化作用，发生下述变化，则x酶是： X酶 A.RNA聚合酶 C.DNA聚合酶 D.限制酶 B.D