凝胶成像仪使用步骤及注意事项.docVIP

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凝胶成像仪使用步骤及注意事项

琼脂糖凝胶成像系统使用说明 主操作界面。 二、打开仓门,将用电泳仪跑好的含Goldview染料的胶块转移到照胶仪的载胶板上,将胶块摆正,然后关紧仓门。 打开电脑菜单中的Image Lab软件,运行程序。 1、程序运行后的界面。可根据自己的实验需求选择不同的选项,在选项左边选框中打上“√”。 2、在应用程序/选择/核酸凝胶/Ethidum Bromide或根据实验要求选择其它种类。确定后进入下一页面。 3、选择滤光片1,确定。(本实验室此仪器只有1个滤光片) 4、利用放大镜调整胶块大小,调好后选择运行实验协议开始照胶。 5、实验协议运行完成后,胶版上显现泳道和条带,利用左边的工具栏中各种工具对图像进行编辑,使图像达到满意的效果。完成后将结果保存在一个文件夹中,以便于以后查阅。 注意事项: 不要戴手套触摸电脑鼠标、键盘、仓门和灯箱电源开关,防止污染; 注意开机顺序,先开凝胶成像系统,再开软件。 使用过程中禁止开门,防止紫外线外漏。 试验结束后,务必将内部的胶取出,关闭软件。 保持观测室内环境干燥,及时将遗留在观测板上的水或其他液体檫干(可使用软质纸,一般卷纸即可)。 (浓度一般为0.8%~2%)0℃左右(手握烧瓶可以耐受)胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldenView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。GoldenView对皮肤、眼睛会有一定的刺激,为安全起见,操作时应该每次带手套,不小心接触皮肤后应该立刻清洗,并妥善处理废弃物。加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。电泳缓冲液刚好没过凝胶1-2 mm 为好,电泳缓冲液太多则电流加大,凝胶发热。电泳槽中缓冲液使用次数过多,缓冲能力下降。TBE缓冲液可使用10次左右。

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