实验六.肌苷的分析.ppt.pptVIP

* 实验六： 肌苷的分析 肌苷 9b-D-核糖次黄嘌呤 肌苷在体内参与细胞能量代谢和蛋白质合成，提高相关代谢酶的活性，改善肝脏功能，促进受损肝脏的恢复。肌苷片用于急、慢性肝炎的辅助治疗，规格：0.2g。 一、鉴定 2、取本品饱和水溶液2mL（可直接取鉴别1中的滤液），加氨制硝酸银试液数滴，即产生白色胶状沉淀----鉴别嘌呤碱基 1、取本品2片，研细，加水10ml溶解，滤过，取滤液1ml，等体积 3,5-二羟基甲苯溶液(含盐酸，Fe3+)，混匀 ，在水浴中加热约10min，即显绿色----鉴别核糖 3、将本品配成10mg/mL的溶液，在200-400nm波长内扫描，在248nm±1nm处有最大吸收，在222nm±1nm处有最小吸收。 吸光度 400 360 330 300 270 260 255 250 248 波长(nm) 吸光度 245 240 230 225 222 220 215 210 200 波长(nm) 溶液配制：取10片肌苷片，精密称定，计算平均每片质量，研细，精密称取适量（相当于肌苷0.1g），置于100ml容量瓶，加水充分振摇溶解，用水稀释至刻度，滤过。精密量取续滤液1.0mL ， 置100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，制成每ml约含10mg的溶液。 二、次黄嘌呤的检查 精密称取本品0.5g，置50mL量瓶，加水溶解并稀释至刻度，摇匀过滤，取续滤液（已配制）， 吸取上述溶液1mL（毛细管高度约3mm即可），以次黄嘌呤的饱和水溶液为对照品，分别点于3cm ×20cm层析滤纸上，以水为展开剂，上行展开至6~7cm处，取出晾干，于紫外灯254nm下检视，不得出现杂质斑点。 肌苷 次黄嘌呤 + 三、含量测定（紫外分光光度法） 取鉴定3中的溶液，测定248nm±1nm附近的最大吸光度，已知肌苷的百分吸收系数 为460，根据朗伯比尔定律。计算肌苷片的含量，并与标示量比较。 吸收系数法： 四、操作要点 1.纸色谱检查中，起始样点面积尽可能小，否则展开后斑点扩散 严重，影响观察； 2.氨制硝酸银实验观察到现象后立即清洗试管； 3. 本实验用吸光系数法测定含量，其优点是操作简便、快捷， 不必用对照品。但该法受仪器精度、操作及环境因素等影响较 大，因此测定前必须对紫外-可见分光光度计进行校正与检定， 波长、吸光度的准确度、杂散光均应符合要求，才能保证结果 的准确。 附录：2010版药典中肌苷的分析方法 *