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UVPROBE简易操作手册-仪器信息网
UVPROBE简易操作手册
启动UVPROBE以后出现以下窗口:
首先应该从下拉式菜单的仪器项①上追加需要的仪器,但竞赛时仪器项默认为1700,不用选择。然后点击上图的连接键②,这样装置与PC机连接并开始下示的初始化面。
初始化大约需要5分钟左右,进行一系列的检查和初置,如一切顺利通过就可以开始测定。
此工作也许在竞赛时也已完成,根据竞赛实际情况完成操作。
联机后,连接按钮变为灰色。
首先选择测定的方式,在主菜单上能发现右图所示的各工具。
上面工具中,从左至右分别为:
1.报告生成器:用于制作各种格式的报告。
2.动力学测定方式:一般测定吸收值随时间的变化,通常用于酶反应随时间的变化。
3.光度测定(定量)方式:可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。由于具有自定义方程的功能,DNA/蛋白质测定等以前需要特殊选购的软件才能进行的工作,使用UVPROBE可自编程序进行测定。
4.光谱测定方式:可进行紫外可见区的光谱测定。
第一步,仪器校正(656nm)
点击光谱测量方式,先不放比色皿,点击菜单栏上的键,即可出现如下图所示的选择测定条件的画面:
在此对话框中选择波长测定的范围(660~650)、扫描的速度(中)。
点击图中[仪器参数]标签,选择测定种类(吸收值、透射率、能量、反射率)为能量方式。光源为D2,增益为2。
此处可不设置打印报告及文件名。
点击主菜单上的键,可分别开关图象面板(图中的左键)、数据处理面板(中)以及方法面板(右键)。只需打开图象面板和数据处理面板即可。
点击“开始”即可开始测定。点击菜单上峰值检测工具,可出现如下画面。
在数据处理面板上点击鼠标右键,出现快捷菜单,在此菜单中选择标记峰,显示峰值,不用先标记谷及显示谷值。
此时可读出最大吸收波长应为656±0.3nm,即为仪器合格。在记录中记下峰位置,计算波长偏差为656.1—实测
点击文件菜单,选择另存为,出现如下对话框:
点击出现
输入准考证号,点击确定,输入文件名(可自定义)保存即可。
第二步,标样光谱检出
点击菜单栏上的键,设置波长测定的范围为780~400nm、扫描的速度设为快。
点击图中[仪器参数]标签,选择测定种类(吸收值、透射率、能量、反射率)为吸收值方式。光源为D2,增益为2。确定。
放入比色皿(均放入参比),打开图象及数据处理面板,然后点击基线②进行基线校正,之后点③波长设置到500nm,再点击①自动调零。
然后样品池装入样品,点击④开始测定。点击峰值检测工具。然后记录峰值及强度,选择文件另存为进行存储。
根据谱图适当稀释样品并确定精细扫描区间(30nm)。再次点击菜单栏上的键,设置波长测定的范围、扫描的速度设为慢。确定之后点击④开始测定。点击峰值检测工具,记录峰值及强度,选择文件另存为进行存储。
最大吸收波长结果报出为细测峰值加上波长偏差。
样品测定
点击光谱测量方式,再点击菜单栏上的键,设置波长测定的范围为780~400nm、扫描的速度设为中速。
点击图中[仪器参数]标签,选择测定种类(吸收值、透射率、能量、反射率)为吸收值方式。光源为D2,增益为2。确定。
放入比色皿(均放入参比),打开图象及数据处理面板,然后点击基线②进行基线校正,之后点③波长设置到500nm,再点击①自动调零。
然后样品池装入样品,点击④开始测定。点击峰值检测工具。然后记录峰值及强度,选择文件另存为进行存储。
测定标样,制作单点工作曲线
在菜单栏上先点击光度测量方式,再点击菜单栏中的键,出现下图:
点击概要,根据提示选择输入用户信息为准考证号。
输入最大吸收波长。点加入。选择校准,选择类型为单点,标样浓度单位设置为mg/L。点下一步,数据采集选择为仪器,样品重复选5,根据提示选下一步,最后关闭。
在菜单栏上有右列各键,点击以后分别出现标准表(最左)、样品表(左2)、
工作曲线图(右2)和样品图(最右)。
点击和,出现如下图象:
比色皿中均装入空白,点基线进行基线校正,然后输入波长为500nm,点自动调零。
样品室内放入标准溶液,点击上图下方的读数键即可。输入样品名称及浓度。标准测定完毕,工作曲线自动显示。
鼠标右键点击曲线,选择属性→方程,选中方程,
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