(精品课件)S1-1 DNA重组技术的基本工具幻灯片.pptVIP

基因工程 基因工程 选修3 概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严 格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等 技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产 品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行 设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或 基因拼接技术。 3、比较基因工程与基因重组 4、转基因成功的原因 （1）、DNA角度 ①、不同生物具有相同的DNA双螺旋结构 ②、DNA的基本单位都是4种脱氧核苷酸 ③、遵循碱基互补配对原则（A-T、G-C） ④、基因是控制生物性状的结构单位和功 能单位 （2）、基因表达角度 ①、各种生物共用一套遗传密码 ②、基因的表达都遵循：中心法则 1.酶的种类： 3、DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 4、回忆 DNA解旋酶： RNA聚合酶： DNA酶： RNA复制酶： 逆转录酶： 10、几种常见育种方法的比较 * 1、什么叫基因工程？ 复习：必修2 概念 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 一、基因工程 2、概念的理解 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 原理 基因重组 生物体外 基因/DNA 分子水平 剪切→拼接→导入→表达 人类需要的基因产物 基因工程 特点 变异大小 重组方式 （物种是否相同） 生殖方式 基因重组（狭义） 有性生殖 无性生殖 同一物种 不同基因间 不同物种 不同基因间 小 大 按照人类意愿， 定向改造生物的性状 培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 二、基因工程的工具 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 “分子缝合针” ——DNA连接酶 “分子运输车” ——载体 （一）、基因的“手术刀”— 限制性核酸内切酶（限制酶） 1、来源：主要是从原核生物中分离纯 化来的 分布：主要是微生物体内 2、特点：特异性 作用——限制性核酸内切酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并在使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 磷酸二酯键 即脱氧核糖、磷酸 之间的连接 A T G G C A T C T T C G A A 大多数限制酶的识别序列由 6 个核苷酸组成，少数由4、5或8个组成。 作用部位： 原核生物很容易受到自然界中外源DNA的入侵， 但是长期的进化过程中，这些原核生物却没有因为 外源DNA的入侵而灭绝。 根据我们刚刚掌握的知识，你能推测这其中的 原因吗？ 原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉，使之 失效，以保证自身的安全，但是不会切割自身的DNA， 这是原核生物在长期进化过程中形成的一套防御机制。 G A A T T C C T T A A G 中轴线 C T T A A G A A T T C G C C C G G G G G G C C C C C C G G G G G G C C C 黏性末端 平末端 大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列: 作用结果 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，如果让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 目的基因片段 质粒DNA片段 重组DNA分子 二、 “分子缝合针” — DNA连接酶 （1）E·coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来。 （2）T4 DNA连接酶（来