第1章2014辩析.ppt

A 重组DNA技术的基本定义 重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。 因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。 B 基因工程的基本定义 基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 C 重组DNA技术与基因工程的基本用途 分离、扩增、鉴定、研究、整理生物信息资源 大规模生产生物活性物质 设计、构建生物的新性状甚至新物种 大规模生产生物活性物质 工程细胞 基因工程 蛋白质工程 途径工程 发酵工程 细胞工程 分离工程 酶 酶工程 分 离 工 程 天然细胞 天然细胞 生物活性物质 生物活性物质 D 基因工程的基本形式 第一代基因工程 蛋白多肽基因的高效表达 经典基因工程 第二代基因工程 蛋白编码基因的定向诱变 蛋白质工程 第三代基因工程 代谢信息途径的修饰重构 途径工程 第四代基因工程 基因组或染色体的转移 基因组工程 ２　基因工程的基本步骤 （1）获得目的基因的DNA片断。 （2）DNA片段与载体连接，构建成重组DNA分子（重组体）。 （3）重组体转移到宿主细胞。 （4）筛选获得含重组体的受体细胞（称为重组子）。 （5）分析鉴定。 （6）构建高效、稳定基因工程细胞。 （7）大规模培养基因工程细胞，获得大量的外源基因表达产物。 （8）表达产物的分离纯化，获得基因工程产品。 三、基因工程的研究内容 （1）基因工程载体的研究 　　有原核载体和真核载体； 　　有克隆载体和表达载体； 　　有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体及其他载体等。 　　　基因工程载体的研究是基因工程研究的重要内容之一。 1．基因克隆工具的研究 （2）工具酶的研究 　　主要包括： 　　　　　　　　　限制性核酸内切酶 　　　　　　　　　DNA连接酶 　　　　　　　　　DNA聚合酶 　　　　　　　　　各种修饰酶 　　　 1．基因克隆工具的研究 （3）基因工程受体系统的研究 　　受体是载体的宿主，是外源基因表达的场所。 　　受体可以是单个细胞，也可以是组织、器官、甚至是个体。 　　目前最常用的受体系统是大肠杆菌受体系统和酵母受体系统。 　　其他受体系统：链霉菌、芽孢杆菌、丝状真菌及动物细胞。 　　利用动物的组织（如：乳腺组织、胚胎组织等）作为受体进行 　　基因表达的研究等 1．基因克隆工具的研究 　　以PCR为基础的差异筛选技术 　　长片段的DNA序列测定技术 　　高通量的基因芯片技术 　　借助计算机和互联网的生物信息技术，等等 　　…… 2．基因克隆技术的研究 　　基因是一种有限的重要战略性资源 　　人类基因组计划中科学家们的最新研究结果，人类基因总数比预期的低得多，初步定位在2.6～4.0万个之间，如此少的基因自然成为激烈竞争的对象。 3．克隆对象——目的基因的研究 　　基因工程药物——高新技术产业——新的药业革命 　　1982年美国Lilly公司首先将重组胰岛素投放市场。 　　已有50多种基因工程药物上市，近千种处于研发状态 　　美国生物技术公司已有2000多家，欧洲共有约1000家 　　2000年，基因工程药品全世界年销售额600亿美元。 　　前九位的分别是：单克隆抗体、疫苗、基因治疗、白介素、干 　　扰素、生长因子、重组可溶性受体，反义药物和人生长激素。 4．基因工程产品的研究 四、基因工程的安全性问题 　　转基因植物中的具有某种抗性的基因有可能通过杂交转移到其野生或半驯化种中去，这种转移的结果是在特定条件下将增强这些植物杂草化的特性，并最终造成生态环境的破坏。 （1）生态环境方面 四、基因工程的安全性问题 　　转基因植物（动物）一般都具有某种优势特征，因此在自然环境中，将有可能通过改变物种间的竞争关系而破坏原有自然生态平衡。 　　如：一棵抗吃种子害虫的转基因松树会由于种子抗虫而大量保留下来，最终在数量大大超过其它物种，导致森林群落遭到破坏。 （2）生物多样性方面 四、基因工程的安全性问题 　　转基因生物作为食品进入人体，很有可能出现某些毒理作用和过敏反应。 　　儿童饮用转基因大豆豆浆产生过敏反应， 　　转基因西红柿导致厨师过敏的事件； 　　转基因猪虽然比正常猪大一倍，出肉量也多一倍，但百病缠身，患有胃肿瘤、肺炎、心力衰竭和关节畸形，因此人食用后也存在患病的可能 （3）影响人体健康方面 四、基因工程的安全性问题 　　1992年召开联合