（激肽原酶）对永久性脑梗塞后大鼠脑血流的影响.pptVIP

本实验研究目的 利用激光散斑成像技术研究尤瑞克林（激肽原酶）对永久性大鼠脑梗塞模型后梗死区局部脑血流的影响 研究背景 激光散斑成像技术作为一种新兴的光学成像技术，可以活体监测脑血流的变化，获得大脑血流的直接信息，具有时间空间分辨率高的特点，为我们观测局部脑局部微循环提供了一种全新的平台 此平台仅国家光电实验室具有，并具有强大团队提供技术支持。 研究内容 激光散斑成像系统监测MCAO后皮质区及大脑中动脉供血区脑血流的变化 脑梗死体积测量(TTC) 神经功能评分评定(Longa评分) 分别于MCAO前，MCAO后15min，MCAO后1h(给药后30min)及24h于激光散斑成像系统下监测血流 每间隔30S获得一帧图像，连续获得15帧图像以获取脑血流分布，图像记录软件采用M-Laser Contrast Imaging Softwar（武汉国家光电实验室） 大鼠于缺血后48h断头取脑组织 ,计算脑梗死体积 实验大鼠在缺血后4h﹑36h进行神经功能缺损评分,采用Longa 0～4分的评定法, 0 =无神经缺损症状; 1 =不能伸展左前爪; 2 =向左侧转圈; 3 =向左侧倾倒; 4 =无自发行走动作。 试验方法及材料 实验材料 SD大鼠；激光散斑成像系统（武汉国家光电实验室）；高速电动颅骨钻；小动物恒温控制板；大鼠立体定位仪；水合氯醛；尤瑞克林注射液等 实验动物分组 成年雄性SD大鼠24只（同济医学院动物中心提供），体重在220至280g，随机分为3组 1）MCAO+尤瑞克林大剂量组: 制作MCAO模型后，给予大剂量尤瑞克林 2）MCAO+凯力康小剂量组: 制作MCAO模型后，给予小剂量尤瑞克林 3）MCAO+生理盐水组： 大鼠永久性MCAO后，给予相同剂量生理盐水 试验方法 动物模型制作，包括颅骨开窗和大脑中动脉梗塞模型（MCAO）的制作 颅骨开窗：实验动物采用10%乌拉坦和2%水合氯醛混合（9ml/kg）经腹腔注射麻醉后， 固定于脑立体定位仪上。以高速电动颅骨钻慢慢打磨颅骨直至硬脑膜外（保持硬脑膜完好无损），形成一个前至前囟，左至矢状缝，右至右侧颞线，后至冠状缝的一个约10×6mm的颅骨窗 MCAO制作 选用直径0.205mm的尼龙钓鱼线，长度为30mm，以口腔用硅橡胶将鱼线涂制成直径约为0.28mm，且前端光滑。 大鼠仰卧位固定，常规切开颈部皮肤，分离右侧颈总动脉，颈外动脉，颈内动脉，在颈总动脉距颈内与颈外动脉分叉处约5mm处将线栓轻轻送入大脑中动脉，栓入深度约18—20mm 整个实验过程一直用小动物温控板维持肛温在(37.5±0.5℃)之间 脑梗塞体积计算按公式[(各片正反面梗死面积之和／2)×片厚]／[(各片正反面总面积之和／2)×片厚]×100％计算梗死体积占所取脑组织体积的百分比 结 果 大剂量组动物的皮质脑血流及大脑中动脉供血区血流在给药30min后及24h有明显改善 部分大脑皮层血管管径增粗，血流流速加快 小剂量组及生理盐水组无显著变化 各个时间点皮质脑血流的变化 大脑中动脉供血区血流变化 本研究同时观察了尤瑞克林对血管的影响 各组不同时间点CBF变化 各组不同时间点CBF变化 脑梗塞体积 神经功能评分 4小时神经功能评分大剂量组与生理盐水组比较，有统计学差异（P0.01），其余各组之间无统计学差异（P 0.05）。 缺血36小时后，各组之间均无统计学差异。（P 0.05） 讨 论 本实验研究表明，静脉注射尤瑞克林后，显著提高了大鼠皮质血流和大脑中动脉供血区的血流量，减小了缺血后脑梗塞的体积。 本研究比较了不同剂量尤瑞克林对脑血流的影响，大剂量组疗效显著，小剂量组疗效不明显。 给药24h的脑血流恢复与30min相比有统计学差异，可能与24h更多的大脑侧支循环建立有关。 大脑中动脉供血区局部血管的改变，部分动脉血管的血流由MCAO后的完全被阻断或仅有有少量残余，在给药后30min及24小时后得到较显著的恢复，且血管直径和血流流速均有明显提高，可能与脑本身存在的侧支循环开放密切相关。 本研究对MCAO后4小时和36小时的神经功能评分表明，静注大剂量尤瑞克林可以显著改善了MCAO后4小时的神经功能缺损状况 36小时后改善不明显，可能与所采用的动物模型（永久性梗塞）﹑神经功能评分方法等相关。 创新点 在本研究之前，对于尤瑞克林对梗塞后脑血流直接观测的研究极少，最多达到有激光多普勒的多点短时局部监测，对于全脑血流尚未有比较准确和细致的观测,亦未见对脑血流MCAO后24h的监测； 尚未见对局部血管（尤其是小动脉）活体监测的研究报道； 本研究采用的激光散斑成像系统，是一种全新的光学观测系统，空间分辨率高，