04动物细胞培养-HXY.pptVIP

4.5.2 细胞的复苏 （1）快速解冻：1-2min升温到常温，使细胞迅速通过最易受损的-5--0℃，避免重结晶 （2）解冻操作过程动作要轻 特别注意： 解冻时务必注意安全，预防冷冻管爆裂。要带手套，用镊子将细胞冷冻管从液氮中取出，放入37℃水浴中。切不可直接用手，以免冻伤 冷冻管在水浴中解冻时，液面不可超过冻存管盖面，否则，易发生污染 复苏细胞的方法: 从液氮中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴中快速解冻。 将1－2ml 冻存细胞液加入到25ml 新鲜完全细胞生长培养液中，轻轻混匀。 用800-1000rpm离心2－3 分钟（ 5min），弃上清液。 用完全生长培养液轻轻悬浮细胞团，并计数细胞。 接种细胞到培养瓶中，起始密度不低于3×105/ml。24-48h 后换液。 1. 贴身运输 2. 冰瓶运输 3.液氮罐运输 * 4.5.3 细胞的运输 * 胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形核，胞质突起，生长时呈放射状。除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间充质起源的组织，如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈本型状态。另外，凡培养中细胞的形态与成纤维类似时皆可称之为成纤维细胞。 * 细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形核，细胞彼此紧密相连成单层膜。生长时呈膜状移动，处于膜边缘的细胞总与膜相连，很少单独行动。起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成