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胰酶制备新工艺的研究
胰酶制备新工艺的研究
作者:吴晓英 张聚宝 林影 梁惠仪 李彦奇
【关键词】? 胰腺
??? 摘? 要? 目的 研究从猪胰腺中提取胰酶的新工艺。方法 使用φ=7.5%异丙醇为提取溶剂,添加ρ=0.2% CaCl2和φ=1%胰酶粉为激活剂以及适量的保护剂,并加入NaHCO3使体系的pH稳定在6.5~7.0之间,在室温下提取3 h。结果 在优化工艺条件下,制得的胰酶制品中的胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的酶活力分别达5 200、 57 300、 37 000 u/g以上,为中国药典所规定的最低酶活的8~10倍,收率10%~12%。结论 该工艺简单、提取效率高、产品酶活高。
关键词? 猪;胰腺;胰酶;胰蛋白酶;胰淀粉酶;胰脂肪酶
Preparation of pancreatin from swine pancreas
WU Xiaoying, ZHANG Jubao, LIN Ying, LIANG Hueiyi, LI Yanqi
(Dept. of Bioengineering, South China University of Technology And Engineering, Guangzhou 510640,China)
Abstract?? Objective To study the new processing technique of pancreatin from swine pancreas. Methods Used 7.5% isopropyl alcohol as extracting solvents; added 0.2% CaCl2 + 1% pancreatin as protecting agents; regulated pH 6.5~7.0 with NaHCO3; extracting time 3 h. Results Under optimum conditions, pancreatin with high activity and yield was obtained. The activities of trypsin, lipase and amylopsin were over 5 200 u/g, 57 300 u/g and 37 000 u/g respectively, and the yield was 10%~12%. Conclusion It is a simple and time saving technique for the preparation of pancreatin with high purity, high activity and high yield.
Key words? swine pancreas; pancreatin; trypsin; steapsin; amylopsin
胰酶是从猪、牛、羊等哺乳动物的胰腺中提取得到的一种混合酶制剂,主要成分为胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶,还有羧肽酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶和核糖核酸酶等。胰酶系我国和国际上多国药典收载的助消化药品,用于治疗消化不良、食欲不振及肝脏疾患引起的消化障碍等。此外,由于胰酶中含有多种活性成分,可作为原料药从中提取所需生化物质。同时,工业胰酶广泛用于皮革加工,它优于其他微生物来源的蛋白酶,对皮革的软化、脱脂、松紧度起较好的调节作用。国内外对胰酶的需求量较大。
从猪胰腺中提取胰酶的工艺已有不少报道[1~4],但活性和收率不尽满意,为更充分利用有限的胰腺资源,参照国内外的文献[5~7],比较了不同提取工艺的优缺点,对胰酶制备的多种条件如激活剂、提取溶剂、保护剂、激活时间和酸度等进行探索,建立一条利用稀异丙醇从猪胰腺中提取胰酶的新工艺。
1? 材料与方法
1.1? 实验材料?
猪胰腺、十二指肠、苦胆均由广州茅山肉联厂提供,在屠宰后1 h内放入冰盒中保温,在3 h内胰腺和十二指肠放入-20 ℃冰箱中冷冻,胆汁置细口瓶中在4 ℃冰箱中保存。
1.2? 试剂?
酪蛋白,供胰酶测定专用,中国药品生物制品检定所提供;马铃薯淀粉,生化试剂;其他试剂均为分析纯。
1.3? 仪器?
756MC紫外可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;LD5-2A医用离心机,北京医用离心机厂;PHS-3C型pH计,上海精密科学仪器有限公司雷磁仪表厂;WX-2型真空泵,临海市精工真空设备厂;ZK82B真空干燥箱,上海实验仪器厂。
1.4? 测定方法?
胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的酶活力测定和炽灼残渣、干燥失重均按中国药典[8]方法进行。
1.5? 基本工艺
冻胰,绞碎适量稀异丙醇???? 保护
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