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酶工程 填空、选择、判断 1、酶催化作用的特点 具有转移性、催化效率高和作用条件温和等 2、酶的可逆性抑制作用可分为哪三种？Km、Vm如何变化？ 分为竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争性抑制。竞争性抑制Km增大、Vm不变；非竞争性抑制Km不变、Vm减小；反竞争性抑制Km、Vm同时减小 3、按照分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为哪两大类别 蛋白类酶和核酸类酶 4、蛋白类酶系统分类的六大类酶是？核酸类酶初步分为哪两类？ 蛋：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶。核酸：分子内催化R酶、分子间催化R酶。 5、酶的生产方法可以分为哪3种 提取分离法、生物合成法、化学合成法 6、酶的发酵生产是当今生产大多数酶的主要方法。（对） 7、酶的合成模式有哪四种，最理想的合成模式是延续合成型。 同步合成型、延续合成型、中期合成型和滞后合成型。最理想的合成模式是延续合成型 8、产酶微生物有细菌、放线菌、霉菌、酵母。（对） 9、在α-淀粉酶的发酵生产中，应当选择淀粉为碳源，而不采用果糖为碳源；同样，在β-半乳糖苷酶的发酵生产中，应当选用乳糖为碳源，而不以葡萄糖为碳源。（对） 10、细胞发酵产酶的最适pH与生长最适pH往往有所不同；有些细胞发酵产酶的最适温度与细胞生长最适温度有所不同。（对） 11、发酵动力学包括哪三个动力学？ 细胞生长动力学、产物生成动力学、基质消耗动力学 12、固定化原生质体发酵产酶主要用于胞内酶的生产。（对） 13、从外植体获取植物细胞的方法主要有？ 直接分离法、愈伤组织诱导法、原生质体再生法等 14、动物细胞培养方式有？动物细胞培养的温度一般控制在36.5，pH控制在7.0-7.6。（对） 悬浮培养、贴壁培养、固定化细胞培养 15、细胞破碎的方法？机械破碎法有哪些？物理破碎法有哪些？化学破碎为防止酶变性失活，应当在低温的条件下进行。细胞破碎中酶促破碎法可以采用的方法是？ 细胞破碎：机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法、酶促破碎法。 机械破碎：捣碎法、研磨法、匀浆法； 物理破碎：温度差破碎法、压力差破碎法、超声波破碎法； 化学破碎：添加有机溶剂、添加表面活性剂； 酶促破碎：自溶法、外加酶制剂。 16、酶提取的方法有哪些？影响提取的主要因素有哪些？ 盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取、有机溶剂提取。 因素：温度、PH、提取液体积等 16、密度梯度离心的梯度介质是蔗糖、甘油，等密梯度离心的介质是铯盐。（对） 17、两性电解质在等电点时溶解度最低。（对） 18、粗滤主要用于分离酵母、霉菌、培养基残渣及其他大颗粒固形物？微滤技术主要用于除去细菌等微生物？超滤主要用于分离病毒和各种生物大分子？透析主要用于酶等生物大分子的分离纯化，从中除去无机盐等小分子物质。（对） 18、吸附层析中，常用的吸附剂有硅藻土、多孔陶瓷和活性炭等；洗脱剂有甲醇、乙醚等 20、实验室中常用的分配层析方法有：纸上层析、薄层层析 21、按活性基团的性质不同，离子交换剂可分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。阳离子只能被阳离子交换剂交换吸附，阴离子只能被阴离子交换剂交换吸附。（对） 22、凝胶层析是根据各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的。凝胶材料的孔径越大，分离物质的分子量范围越大。（对） 23、凝胶材料主要有葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺等，凝胶层析的操作一般包括：装柱、上柱、洗脱等 24、电泳技术主要用于酶的纯度鉴定、酶分子质量测定、酶等电点测定以及少量酶的分离纯化。常用的电泳技术：聚丙烯酰胺凝胶电泳（对） 25、按照两相的不同，萃取的方法可以分为？目前在超临界萃取中最常用的超临界流体是二氧化碳？反胶束中，极性基团在内，非极性在外，形成水池。 有机溶剂萃取、双水相萃取、超临界萃取和反胶束萃取 26、在固体酶生产中，常用的干燥方法有？ 真空干燥、冷冻干燥、喷雾干燥、气流干燥、吸附干燥 26、α-淀粉酶的发酵生产、保存和应用过程中，添加一定量的钙离子，有利于提高和稳定α-淀粉酶的活力。（对） 27、在大分子修饰中，聚乙二醇应用最为广泛。通过大分子修饰可以降低或消除酶蛋白的抗原性。 28、侧链基团修饰可以用于研究酶的活性中心中的必需基团。 30、通过肽链有限水解修饰可以把没有活性的酶原变为有活性的酶 31、氨基酸置换修饰属于定点突变技术。 29、酶固定化吸附法当中常用的固体吸附剂有活性炭、硅藻土等 30、凝胶包埋法中常用的凝胶有琼脂凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。常用的交联剂是戊二醛。 31、凝胶包埋法是应用最广泛的固定化方法，适用于各种微生物、动物和植物细胞的固定化。 32、固定化方法中的结合法可分为离子键结合法和共价键结合法 33、固定化酶特性的改变：稳定性、最适温度、最适pH 、底物特异性（理解如何改变）P164 36、植物细胞固定化的方法主要有