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微生物学知识点 1、微生物的概念：是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。 2、微生物在生物分类中的地位： （1）动物界 （2）植物界 （3）原生生物界：原生动物、大部分藻类及黏菌 （4）真菌界：酵母、霉菌 （5）原核生物界：细菌、放线菌、蓝藻菌等 （6）病毒界 微生物的生物学特性：代谢活力强；繁殖快；种类多、分布广；适应性强、易变异 微生物形成与发展过程中，生物学家的贡献： 巴斯德：（1）彻底否定了“自然发生”学说； 免疫学——预防接种； 证实发酵是由微生物引起的； （4）巴斯德消毒法 柯赫：（1）具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌； 发现了肺结核病的病原菌； （3）提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫原则 细菌的个体形态分为球状、杆状和螺旋状，分别称为球菌、杆菌和螺旋菌。 细菌个体的大小：细菌细胞一般都很小，必须借助光学显微镜才能观察到，因此测量细菌的大小通常要使用放在显微镜中的显微测微尺来测量。细菌的长度单位为微米（um）。球菌的大小以其直径表示，杆菌，螺旋菌的大小以宽度×长度来表示。 细菌细胞的基本结构包括细胞壁、细胞质壁、细胞质及细胞核4部分，有些细菌还有荚膜，鞭毛和芽孢等特殊结构。 细胞壁的结构：构成细胞壁的基本骨架是肽聚糖层，由氨基酸和氨基酸组成，它含有N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸两种氨基酸，这两种氨基酸或直接或通过甘氨酸间桥交替相连形成长链。 细胞壁的功能：（1）具有保护细胞及维持细胞外形的功能； 细胞进行物质交换的屏障； 为正常细胞生长，分裂所必需； （4）与革兰氏染色法密切相关 革兰氏染色法 原理：细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是由肽聚糖层厚度和结构决定的。 结果：在初染和媒染剂前两个阶段，G+和G-都为紫色，经过95%乙醇脱色之后，G+仍为紫色，而G-则脱去紫色，用蕃红复染后，G+仍然是紫色，G-则变为红色。 细胞膜的功能：（1）使细胞具有选择吸收性能；（2）控制物质的吸收与排放；（3）与呼吸作用和磷酸化作用的细胞能量平衡是相联系的。 原核细胞膜不含固醇，但有些原核细胞膜中含有五环类固醇，其结构类似于真核细胞膜中的固醇，可能有加固细胞膜的作用。 细菌细胞的特殊结构： （1）鞭毛：从体内长出纤细呈波状的丝状物称为鞭毛，是细菌的“运动器官”。 （2）荚膜：有些细菌在生命过程中在其表面分泌一层松散透明的粘液物质，具有一定的外形，相对稳定地附于细胞壁外面。使细菌具有比较强的抗干燥作用。 （3）芽孢：有些细菌当生长到一定时期繁殖速度下降，菌体的细胞原生质浓缩，在细胞内形成一个圆形、椭圆形或圆柱形的孢子，对不良环境条件具有较强的抗性的休眠体称为芽孢。 （4）纤毛：是细胞游离面伸出的能摆动的较长的突起纤毛具有一定方向节律性摆动的能力℃下，但时间不宜过长。 （2）增殖培养：在分离细菌时，培养基中添加浓度一般为50ug/ml的抗真菌剂，可以抑制真菌的生长。在分离放线菌时，培养基中通常添加抗真菌剂制霉菌素或放线菌酮，以抑制真菌的繁殖。在分离真菌时，培养基中加入一定的抗生素即可有效地抑制细菌生长及其菌落形成。 （3）培养分离：常用的分离方法有稀释分离法、划线分离法和组织分离法。 （4）筛选：经过分离培养，在平板上出现很多单个菌落，通过菌落形态观察，选出所需菌落，然后取菌落的一半进行菌种鉴定。第一步，是将分离菌落转移到试管斜面纯培养；第二步，通过三角瓶的容量进行小型发酵实验，以求得适合手工业生产用菌种。 （5）毒性试验：除黑曲霉等无须作毒性试验外，其他微生物均需通过2年以上的毒性试验。 营养缺陷型的检出方法很多，主要有：影印法、夹层法、逐个检出法、限量补充培养法。 微生物菌种保藏原理：采用低温、干燥、缺氧、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂等方法，挑选优良菌种，最好是它们的休眠体，使微生物生长在代谢不活泼、生长受抑制的环境中。 （1）蒸馏水悬浮法：好气性菌和酵母等可用此法保存。 （2）斜面传代保藏：可用于实验室中各类微生物的保藏。 （3）矿物油中浸没保藏：可用于丝状真菌、酵母、细菌和放线菌的保藏。 （4）干燥——载体保藏：可用于产孢子或芽孢的微生物的保藏。 （5）冷冻保藏：a 普通冷冻保藏，可以维持若干微生物的活力1-2年； b 超低温冷冻保藏技术：可维持若干细菌和真菌菌种的活力 5年不受影响； c 液氮冷冻保藏技术：工业微生物菌种保藏的最好方法。 （6）真空冻干保藏：是微生物菌种长期保藏的最为有效地方法之一。 （7）寄主保藏：可用于一些难以用常规方法保藏的动植物病原体