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(二)电子显微镜(electron microscope, EM) 分辨率0.2nm, 是光镜1000倍 所见结构称超微结构(ultra-structure) 透射电镜(transmission electron microscope) ——观察细胞内部结构 扫描电镜(scanning electron microscope) ——观察组织或细胞表面的立体结构 (1)透射电子显微镜 放大倍数几万倍到几十万倍。因此,电镜能观察到细胞的更微细结构。 组织标本须用戍二醛或锇酸固定,树脂包埋,切厚50~80nm超薄切片,经铅盐等重金属盐染色后镜下观察。 电镜下所见结构称为超微结构。又称为电镜结构。 (2)扫描电子显微镜 固定后的标本,在其表面喷镀金,在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构,如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。 各种显微镜的分辨率与人眼的比较 分辨率 人眼 0.2 mm 普通光镜 超高分辨率 0.2 μm 20-100nm 透射电镜 0.1~0.2 nm 扫描电镜 2.5 nm 应用化学反应或物理反应,使细胞、组织的某种化学成分形成有色终末产物,在镜下观察,从而对这种化学成分进行定位、定性和定量的研究。 过碘酸-Schiff反应(PAS反应):过碘酸氧化多糖,形成a-醛基,再与Schiff试剂结合,形成紫红色沉淀物。用于判定多糖的存在部位。 过碘酸 亚硫酸品红 乙二醇基———?乙二醛基—————?红色化合物 (3)组织化学技术 2、免疫组织化学(immunohistochemistry) 利用抗原(antigen, Ag),抗体(antibody, Ab)特异结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。 标记物为荧光素、过氧化物酶或金颗粒 (4)免疫组织化学技术 (三)几种特殊显微镜术 1、相差显微镜( phase contrast microscope) 2、荧光显微镜(fluorescence microscope) 3、激光共聚焦扫描显微镜( confocal laser scanning microscope) 激光共聚焦 超高分辨率 透射电镜 (六)组织培养(tissue culture) 是将离体的细胞、组织或器官置于培养基中,在无菌和适宜温度及酸碱度条件下进行培养的一种技术方法 1、理解平面与立体的关系,建立立体观念 2、注意结构与功能的关系 3、理论联系实际 4、前后关联、综合分析 三、组织胚胎学的学习方法 小结 组织学和胚胎学的定义及研究内容 2. 基本组织的类型 3. H.E染色方法 * 组织学与胚胎学 刘明兮 025Mingxi.liu@njmu.edu.cn Antonie van Leeuwenhoek 列文虎克 1674年他开始观察细菌和原生动物即他所谓的“非常微小的动物”。他还测算了它们的大小。1677年首次描述了昆虫、狗和人的精子。1684年他准确地描述了红细胞。 1665年,英国科学家胡克(R.Hooke,1635-1703)使用诞生不久的显微镜观察软木塞切片,首次发现蜂窝状的植物细胞。此后100多年间,许多学者对动植物细胞进行了广泛的观察,但对细胞的内在结构、功能及其在生物体内的地位尚不明了。 1838年,德国植物学家施莱登(M.J.Schleiden,1804-1881)在前人研究成果的基础上提出:细胞是一切植物的基本构造;细胞不仅本身是独立的生命,并且是植物体生命的一部分,并维系着整个植物体的生命。 1839年,德国动物学家施旺(T.A.H.Schwann,1810-1882)受到施莱登的启发,结合自身的动物细胞研究成果,把细胞说扩大到动物界,提出一切动物组织均由细胞组成,从而建立了生物学中统一的细胞学说。 组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学 细胞(cell) 细胞外基质(extracellular matrix) 组织(tissue) 上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织 器官和系统(organ system) 人体 一、组织胚胎学的研究内容 Microscopic anatomy (一)组织学研究内容: 生殖细胞 精子和卵子发生的研究 受 精 受精和早期胚胎发育的研究 早期胚胎发生和发育 胚胎器官的发育 胚胎发育异常 胚胎学(embryology):研究人体出生前发生、发育过程及其规律的一门科学 (二)胚胎学研究内容: 受精卵(zygote) 胚(embryo)(2~8w) 胎(fetal)(9~38w) 儿(baby) 产科学和计划生育 解剖学器官位置、形态、变异
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