自由水束缚水含量测定专用课件.pptVIP

* 实验一、植物组织中自由水和束缚水含量的测定 亲水物质 被吸附的水分子 自由水/束缚水是衡量植物代谢强弱和抗性的生理指标之一。 一、原理 植物组织含水量一般为70%~90%。 存在状态：束缚水和自由水 束缚水（bound water）：被原生质组分吸附，不能自由移动的水分。 自由水（free water）：不被原生质组分吸附，可自由移动的水分。 基于以上原理： 将植物组织浸入高浓度（低水势）的糖溶液中一定时间后，自由水可全部扩散到糖液中，组织中便留下束缚水。 自由水扩散到糖液后（相当于增加了溶液中溶剂）便增加了糖液的重量，同时降低了糖液的浓度。 A * C1 = (X+A) * C2 X = A(C1-C2) / C2 自由水（%）= X / W 用同样的植物组织的总含水量减去此自由水的含量即是植物组织中束缚水的含量。 二、试剂与仪器设备 （一）材料 小白菜叶片 （二）试剂 重量百分浓度为 60 ％～ 65 ％的蔗糖溶液：用托盘天平称取蔗糖 30 ～ 35 g ，置于烧杯中，加水 15 ～ 20 ml ，使溶液总体积为 50 ml ，溶解后备用。 （三）仪器设备 测糖仪，分析天平或电子天平（感量 0.1 mg ），注射器，打孔器（直径 0.5 cm 2 左右），烧杯（200ml），量筒。 三、实验步骤 1. 植物组织中自由水含量的测定 （ 1 ）注射器称重W 1。 （ 2 ）选取部位、长势、叶龄一致有代表性的叶片数片，用打孔器打取小圆片 50 片（注意避开粗大的叶脉），装到注射器中，盖紧并精确称重W 2。 （ 3 ）加入 60 ％～ 65 ％的蔗糖溶液 5 mL 左右，再分别准确称重W 3。 （ 4 ）反复抽气20分钟。用测糖仪分别测定抽气后（C2）及原糖液（C1）的浓度。 可由下式算出： 植物组织中自由水的含量（%）= [（W3-W2）*（C1-C2）/C2 ] / （W2-W1）* 100 2. 植物组织中总含水量的测定（已做） （1）选取部位、长势、叶龄一致有代表性的叶片数片，用打孔器打取小圆片 50 片（注意避开粗大的叶脉），精确称重W4。 （2）将小圆片在烘箱中105度下杀青15分钟，再于80-90度下烘干至衡重，精确称重W5。可由下式算出： 植物组织中总含水量（%）= （W4-W5） / W4* 100 3. 植物组织中束缚水含量的计算 植物组织中束缚水的含量 = 组织中总含水量 – 组织中自由水含量  4. 两人一组，每组取幼叶或老叶做实验重复三次，求平均值。 （结果与相临组比较分析） 注意事项： 1. 测糖仪的正确使用 2. 蔗糖溶液配制时要加热 3. 取样部位要尽量一致 4. 抽气时，边抽边摇晃，抽气要充分 *