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标记免疫技术新进展 上海第二医科大学附属瑞金医院检验科 顾志冬 ACCESS全自动微粒子化学发光免疫系统 化学发光标记自动检测过程 混匀 超声波、搅拌器、震荡 取样 金属针、一次性TIP头 孵育 孵育板、孵育带 分离 磁性颗粒分离 检测 流动比色池、单管比色 O- O O OCH3 OPO3Na2 O O OCH3 O- O OCH3* 发光 Alkaline Phosphatase 发光底物在碱性磷酸酶作用下磷酸酯基发生水解，脱去一个磷酸基而得到一个中等稳定的中间体AMPD-，(半衰期2~30分钟)。此中间体分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子，当其回到基态时产生470nm的光，并可持续几十分钟。 AMPPD反应原理--Access非直接免疫化学发光 AMPPD特性 碱性PH环境下，非酶解性的水解很低 热稳定性好 PH9时酶解速度最快，PH9.5时信噪比最低 发光为持续型，15min达到高峰，60min内强度维持不变 相对 发光 单位 00 5 10 55 60 时间（分钟） 发光图谱连续，稳定。 允许多次记数，取均值作为结果。 AMPPD发光图谱 加入 标本, 磁性微粒子， 试剂 孵育 促进抗原 抗体结合 洗涤，磁性分离， 去除未结合成分 加入发光底物，产生信号 孵育，促使 信号产生 检测信号 ACCESS分析简要流程 ACCESS 专利，独有技术 磁性微粒子技术：d7 ? 超声波清洗系统：交叉污染率1ppm 多层覆膜试剂盒：确保稳定性12-18个月 机上自备试剂冷藏系统：试剂保存于三度 磁性清洗分离技术：保证高灵敏度 随机加入消耗品 与包被管或包被珠相比反应表面积增大50倍，增加了抗体的用量，并因分散悬浮于液体(称为类均相)，大大加快了速度。 又因为是可磁化颗粒，便于自动化和提高B/F分离效率，降低了本底，提高了灵敏度。 试剂容量 24个试剂位 自封闭，多层覆膜试剂盒 机上试剂冷藏装置 试剂保质期长 系统性能 ACS:180 SE 全自动化学发光免疫系统 ACS:180 SE 独特的优势 直接标记的化学发光 - 快速 强烈的直接发光在一秒内完成。ACS分析仪的光度计在整个发光的前,中,后过程中进行500次连续读数。所以出第一个结果的时间很快并可获快速急诊报告。 吖啶酯的发光反应简单,直接,快速。在一秒钟内光子散射已达到高峰，而整个过程亦只在两秒钟內完成。 吖啶酯的直接发光对酸碱度和溫度的变化相对並不敏感，保证了良好的仪器工作性能。 ACS:180 SE 使用电化学发光技术的仪器 Roche Elecsys 1010 , 2010 三种仪器主要性能比较 ACCESS ACS-180 ECL1010、2010 原理 酶扩大化学发光 直接化学发光 电化学发光 灵敏度 10-21 10-16 10-18 测试速度 100tests/H 180tests/H 92tests/H 仪器价格 中 低 高 试剂价格 中 低 高 市场占有量 250台 300台 150台 开展项目 42 25 38 连续检测数