果蝇的性状观察和饲养管理实验报告.doc

实验一：果蝇的性状观察和饲养管理 吴雪薇 121140059 实验目的 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别和某些遗传性状。 实验原理 1、果蝇简介 果蝇（fruit fly，vinegar fly ）广泛存在于全球温带及热带气候区，在果园、菜市场等地皆可见其踪迹，目前已发现1000多种。 果蝇以酵母菌为主要食料，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 黑腹果蝇(Drosophila ) ： 双翅目，果蝇属。 特点： 生活史短，每12天左右即可完成一个世代； 饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖； 繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右； 突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察； 染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 2、果蝇的生活史 25℃时，从卵至成蝇需10天左右。 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫 果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。 最适培养温度20～25℃，温度越高，生长越快，但高于30℃不育甚至死亡。 卵：白色，椭圆形，长约 0.5mm，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。 幼虫：一龄——二龄——三龄，三龄体长4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。 3、果蝇培养基配方 玉米粉11.2克 蔗糖8.9克 干燥酵母粉1克 琼脂1克 水100毫升 添加0.8毫升丙酸作为防腐剂 实验材料 黑腹果蝇品系： 野生型、突变型（三隐性、黑体） 实验为合作实验，我培养的是突变型黑体果蝇 实验仪器 培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、解剖镜、搪瓷杯、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、滤纸、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板。 乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。 实验内容 1.果蝇的饲养管理 使用高温灭菌的培养瓶培养，酵母菌是果蝇的主要食物，凡能发酵的物质都可以用来培养，常用的为玉米饲料。 2.果蝇培养基配制 （1）清洁指管，盖上适当大小的瓶塞，置高压灭菌锅内，以121℃，1.5大气压消毒15分钟，冷却备用。 （2）按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于电磁炉上加热溶解，再加入蔗糖煮沸。 （3）取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖溶液中，煮沸。 （4）待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装（20 ml/管）。 3.果蝇的生活周期观察 果蝇的一生经过卵——幼虫——蛹——成虫四个阶段。生活周期的长短受温度影响很大，一般以20～25℃为适宜。生活周期与饲养温度的关系见表2。 在25℃条件下，果蝇各发育阶段所需时间大致是： 羽化成虫12小时后交配，2天产卵（培养基表层），1天一龄幼虫，1天二龄幼虫，1天三龄幼虫，3天化蛹（化蛹纸或贴在瓶壁上），3～4天成虫（成虫可活15天左右，低温时可活一个月左右）。 4．果蝇的形态观察 （1）转移和麻醉 搬移果蝇至新培养瓶 取一新培养瓶，将瓶塞略为松动，放置于右手侧，取欲转移的果蝇培养瓶置左手侧，左手握住瓶颈，两指轻扣瓶塞顶部，以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面，将培养瓶置于左手侧，拔起瓶塞以左手两指夹住瓶塞外端，再将置于右手侧之新培养瓶瓶塞拔起，以右手两指夹住瓶塞外端，以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上，再以左手握住两瓶口相接处，翻转使新培养瓶位于下方，然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底，使果蝇掉落于新培养瓶瓶底，然后迅速盖上各瓶瓶塞。 果蝇可用乙醚麻醉，以方便实验操作。 麻醉方法： 取一麻醉瓶，瓶口应与培养瓶大小相仿，使两瓶口相对，培养瓶在上，用手拍击培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶内，迅速盖上瓶塞，滴加3滴乙醚于小管口中的棉花上，约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 注意：过度麻醉将导致果蝇死亡。 再麻醉 观察或计数过程中，如见果蝇翻身走动可将麻醉瓶口朝下，盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。 （2）性别鉴定： 最重要的标准是有无性梳。 (3)果蝇观察、计数 取白纸板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白纸板上，解剖镜下进行性状观察。 果蝇具有丰富的外表形态差异，包括眼色、眼形、翅形，刚毛形状与数目等。进行果蝇杂交实验时必须区分性别，务必熟悉雌雄果蝇的差异。 实验结果 转移至我的培养瓶内的是10只突变型黑体果蝇，由于时间限制，未用解剖镜观察，没有看清其他性状。 在果蝇雌雄个体鉴别中，第一对前足有无性梳是区分果蝇雌雄最重要的标准。另外，还可以观察腹部背面黑色条纹的数目和腹部腹面的腹片