植物多糖的提取分离和含量测定的研究.doc

论文题目：植物多糖的提取、分离和含量测定的研究 姓名：刘通 班级：08级药学1班 学号：200810720071 利用百度搜索引擎查找相关资料 利用中国知网的期刊全文数据库查期刊中发表的论文的相关结果 3、利用中国知网学位论文全文数据库查找论文相关资料 4、利用读秀查图书馆收藏的与论文有关资料 利用图书馆OPAC查我馆收藏的印刷型图书 植物多糖的提取、分离和含量测定的研究文献综述 　 对多糖的研究, 最早是在20 世纪40 年代, 但其作为广谱免疫促进剂而引起人们的极大重视则是在60 年代, 经过40 余年的不断发展, 人们对多糖这一类重要生命物质产生了新的认识, 使这一学科成为目前生命科学中研究最活跃的领域之一[ 1 ]。越来越多的研究发现多糖对人体具有极大的利用价值, 按其来源可分为三类: 动物多糖、植物多糖和微生物多糖L 其中植物多糖如人参、黄芩、刺五加、红花、芦荟等所含多糖均具有显著的药用功效, 如免疫增强作用, 抗肿瘤作用, 抗辐射作用等L据文献[ 2 ]报道, 已有近100 种植物的多糖被分离提取出来L 这类多糖来源广泛且没有细胞毒性, 应用于生物体毒副作用小,因此对植物多糖的研究已成为医药界的热门领域。 1　植物多糖的提取分离纯化 多糖的提取分离纯化是指多糖研究中获取研究对象的过程L一般这一过程包括提取分离、纯化和纯度鉴定3 步L其中纯化是多糖研究的关键, 其成功与否、效果的好坏都会直接影响后续研究的可行性与可信度[ 3 ]。 1.1　提取分离 一般植物细胞壁比较牢固, 需在提取前进行专门的破细胞操作, 包括机械破碎(研磨法、组织捣碎法、超声波法、压榨法、冻融法)、溶胀和自胀、化学处理和生物酶降解L因此常用的提取方法有: 热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法和酶法L 其中前3 种为化学方法, 酶法为生物方法。此外, 更有研究者[ 4, 5 ] 在细胞破壁方面进行研究, 利用超声波、微波等技术有效地提高多糖的提取率和产品质量, 并缩短了反应时间。 1.2　纯化 分离沉淀后获得的多糖提取物中, 常会有无机盐、蛋白质、色素及醇不溶的小分子有机物(如低聚糖) 等杂质, 必须分别除去L 多糖的纯化就是指将粗多糖中的杂质去除而获得单一多糖组分。一般是先脱除非多糖组分, 再对多糖组分进行分级L而脱除非多糖组分是先脱除蛋白质再去除小分子杂质。 1.2.1　除蛋白天然植物中多糖与蛋白质 两种高分子成分共存, 且分子量相近, 另外糖常常与蛋白形成糖蛋白复合物, 使蛋白质的脱除更加困难。但也许正是结合了这部分蛋白质, 多糖才具有众多独特的生理功能, 如各种蛋白质聚糖、糖蛋白具有生理功能一样L常用的除蛋白质的方法有Sevage 法、三氯乙酸法、三氟三氯乙烷法、酶法等。Sevage 法为实验室常用法, ,该法以正丁醇与氯仿混合再进行萃取; 蛋白酶法是目前认为较好的方法, 将蛋白质水解再透析去除。 1.2.2　脱色 对于植物多糖可能会有酚类化合物而颜色较深, 对其进行脱色可使其应用范围更加广泛。常用的脱色方法有: 离子交换法、氧化法、金属络合物法、吸附法(纤维素、硅藻土、活性炭等) LDEA E- 纤维素是目前最常用的脱色剂, 通过离子交换柱不仅达到脱色的目的, 而且还可以分离多糖。 1.2.3　除小分子杂质 通过逆向流水透析除去低聚糖等小分子杂质,这样得到的就是多糖的半精品。 1.2.4　多糖的分级纯化 采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物, 即是多分散性的L 其不均一性表现在化学组成、聚合度、分子形状等的不同, 分级的方法可达到纯化的目的。可按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等) , 也可按分子所带基因的性质分级(如按电荷性质级的电泳、离子交换层析等) 。柱层析法较为常用, 可分为两类: 1) 只有分子筛作用的一般凝胶柱层析, 如Sephadex、Sephrose、Biogel 等; 2) 离子交换层析, 这种分级不仅按电荷性质不同, 同时也有分子筛的作用, 如带负电荷的多糖可在阴离子型DEA E2纤维EAE2Sephadex柱上达到分级, 酸性多糖可在阳离子型的羧甲基(CM 2Sephadex) 或磺酸乙基(SE2Sephadex) 等凝胶柱上分离L柱层析法常用水、盐缓冲溶液或酸碱液洗脱以得到分级L。检测手段国内仍沿用经典的苯酚-硫酸法, 国外用比旋度、示差折光检测器, 各组分的蜂位自动记录, 分离效果好而且方便[ 6 ]。 1.3　多糖的纯度鉴定 经过分级纯化的多糖在测定结构前须进行纯度鉴定。 而且多糖的纯度不能用通常化合物的纯度