植物组织培养脱毒快繁技术的综述.doc

植物组织培养脱毒快繁技术的综述 李西雁 （广西职业技术学院　农业技术工程系　2002级应用生物技术专业） 摘要：脱除病毒是植物组织培养深入探讨研究中的一个技术难题。本文结合在桂林莱茵生物科技股份有限公司组织培养脱毒快繁具有无杂菌、质优、分蘖性强、繁殖高、批量生产、周年供应、便于运输等优外植体 愈伤组织 生长点 或 完整植株 发生 胚状体 在有些情况下，再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞[1]。 植物组培脱毒快繁人工在无菌条件下利用植物体的一部分，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物，脱除病毒在大田快速繁殖的技术。广西农科院生物所杭玲罗汉果茎尖脱毒快繁技术青皮果品种采用种子播种的实生苗,经接花叶病毒而致病的植株用生物学指示植物鉴定,脱毒率达100%。mountain）品种无PVX（马铃薯X病毒）的马铃薯植株。此后，通过茎尖组织培养获得无病毒植株的技术迅速发展，为解决马铃薯病毒危害提供了有效途径，为生产提供优良种薯。目前，国际上用茎尖培养产生的马铃薯品种已达150个左右[1]。 科学研究结果证明，侵染马铃薯的病毒有20多种。这些病毒一旦侵入马铃薯植株和块茎，就会引起马铃薯退化，出现各种各样的病态，造成不同程度的减产。研究的结果还证明，病毒在植物组织中分布是不均匀的，并且受一定环境条件影响，在靠近马铃薯茎的顶端病毒浓度很低或不含病毒。根据这一特点，通过茎尖培养可以获得马铃薯无病毒苗[3]。另外，马铃薯病毒，有的对温度比较敏感，有的不敏感，但对植株或发芽的块茎进行高温处理后再作茎尖培养，一般脱毒率都比较高。因此，在茎尖培养前，对植株和发芽块茎进行30~35℃，28天的高温预处理，能收到良好的效果。 4.2 马铃薯茎尖培养脱毒方法 利用茎尖组织培养结合病毒检测，对马铃薯进行脱毒，进而生产脱毒种薯用于生产，可有效地防止种薯退化，大幅度提高马铃薯产量[3]。其主要脱毒方法如下：? 4.2.1 取材和消毒 将欲脱毒地品种块茎催芽，芽长4~5cm时，剪芽并剥去外叶，自来水下冲洗40min，于无菌室内用漂白粉溶液消毒后，无菌水冲洗2~3次。 4.2.3 剥离茎尖和接种 在无菌室内，于40倍地解剖镜下，剥取带1个叶原基地茎尖，接种于MS茎尖培养基地试管中。试管中的MS茎尖培养基包括大量元素、微量元素、有机成分和生长素、细胞分裂素、蔗糖和琼脂，pH值为5.8，经过高压蒸汽灭菌后使用，每试管接种1个茎尖。 4.2.4 培养基和培养条件 茎尖培养的关键是奖脱毒后的茎尖透导生成带有完整根、茎、的植株，因此选择适合的培养基十分重要。对于马铃薯的茎尖培养来说，需要较多的NO3ˉ和NH4+营养，MS和Miller基本培养基都是较好的培养基，而且附加少量（01.mol/l~0.5mol/l）的生长素或细胞分裂素或二者都加，培养的效果更好。接种的茎尖培养于25℃、1500~3000LX光照条件下培养室内，3个月则长成3~4片叶的小植株在无菌条件下，进行切段扩繁一次，取部分苗进行病毒检测[6]。 4.2.5 病毒检测 病毒检测是茎尖脱毒不可缺少的步骤。常用鉴别寄主即指示植物或血清学方法进行检测，及时淘汰血清学阳性反应或在指示植物上有症状的茎尖苗，无任何反应的茎尖苗即脱毒苗用作大田快速繁殖。 4.2.6 结果 通过利用茎尖组织培养结合病毒检测法获得马铃薯脱毒苗，经病毒检测，除去了马铃薯中的病毒病，脱毒率可达100%。 5 植物组织培养脱毒快繁技术应用前景的简述 植物组织培养技术在作物上主要用于育种和良种繁殖，其次用于无性繁殖作物的脱毒和快繁以及种质的保存等，可见植物组织培养脱毒快繁技术对于农作物苗木的生产具有极其重要的地位[1]。一些农作物或是花卉植物等因长期栽培种植，植物体内被侵染携带病毒、种性退化利用组织培养及快繁脱毒方法开发出的植物新品种有棕榈、香蕉、甘蔗花卉植物等几百种再生植株微生物所引起的植物组污染一直是当前制约植物组培发展的主要障碍在接种和培养过程中污染率常常高达 以上如何解决这个问题已经引起很多人的重视.国内许多研究人员开展了这方面的一些研究但还欠缺更深入的探讨桂林莱茵生物科技股份有限公司脱毒效果桂林莱茵生物科技股份有限公司桂林莱茵生物科技股份有限公司 ．．．． ．．．．． ．．．． ．朱德蔚．植物技术[M] ．北京中国科学技术出版社，2001． ．． ．． ．．．． ．．．． ．．．． 广西职业技术学院毕业论文（设计） 第- - 1 - -页