气相色谱基本原理与技术应用.doc

气相色谱仪 操作规程 一、开机前准备： 　　1、根据实验要求，选择合适的色谱柱； 　　2、气路连接应正确无误，并打开载气检漏； 　　3、信号线接所对应的信号输入端口。 二、开机： 　　1、打开所需载气气源开关，稳压阀调至0.3~0.5 Mpa，看柱前压力表有压力显示，方可开主机电源，调节气体流量至实验要求； 　　2、在主机控制面板上设定检测器温度、汽化室温度、柱箱温度，按《输入》键，升温； 　　3、打开氢气发生器和纯净空气泵的阀门，氢气压力调至0.3~0.4Mpa，空气压力调至0.3~0.5Mpa，在主机气体流量控制面板上调节气体流量至实验要求；当检测器温度大于100℃时，按《点火》按钮点火，并检查点火是否成功，点火成功后，待基线走稳，即可进样； 三、关机： 　　关闭FID的氢气和空气气源，将柱温降至50℃以下，关闭主机电源，关闭载气气源。关闭气源时应先关闭钢瓶总压力阀，待压力指针回零后，关闭稳压表开关，方可离开。 四、 注意事项： 　　1、气体钢瓶总压力表不得低于2Mpa； 　　2、必须严格检漏； 　　3、严禁无载气气压时打开电源。 气相色谱法是根据气-固、气-液、气-液-固之间的相平衡，借溶质分配系数的不同而进行分离的方法。 气——固色谱中被分离物随着载气的流动，被测组分在吸附剂表面进行吸附，脱附，再吸附，再脱附……这样反复的过程不同物质在色谱柱中的保留时间不同而达到分离的目的。 气——液色谱中被分离物随着载气的流动，被测组分在固定液中进行溶解，挥发，再溶解，再挥发……的过程，使不同物质在色谱柱中的保留时间不同而达到分离的目的。 2）气相色谱法的特点 ·混合样品在非极性色谱柱上，组份按沸点顺序流出，在极性色谱柱上，其组份按极性大小流出。 ·增加色谱柱长度可改善分离能力。 ·样品组份在固定相和移动相中易扩散，能迅速达到分配平衡，故可提高移动相的流速以缩短分析时间。 ·检测惰性气体中的样品组分时，可以使用各种高灵敏检测器，所以能做极微量分析和特定组分的高灵敏度的选择性检测。 ·容易与质谱仪或付里叶变换红外光谱仪联用，便于多组分混合物的分离和鉴定。 ·适于分析的物质仅限于在某种形式下为热稳定的挥发性物质。所以从全部化合物来看，适用范围较窄，约为20%。 ·在缺乏标准品的情况下，定性分析较困难；对于高沸点不能气化和热不稳定的物质不能用气象色谱法分离和测定。 2、色谱分离条件选择的指标 1）载气及其流速的选择 实际工作中，为了缩短分析时间，往往使流速稍高于最佳流速。 2）柱效能（N） 为了分离某一物质对，当相对保留值不变（固定液、柱温不变），而k值（固定液配比）变化时，k越小越是靠近非保留峰，则完全分离所需的塔板数越多。但扣除非保留峰后（tR-t0）算出的有效板数（neff）却保持不变，则分离情况也可保持不变。 3）柱温选择的原则： 在使最难分离的组分能尽可能好的分离前提下，尽可能采取较低的柱温，但以保留的时间为宜，峰形不脱尾为度。 4）选择性（α） 所谓选择性就是固定液对于两个相邻组份的相对保留值，也就是某一难分离物质对校正保留值之比，以α表示。α代表固定液对难分离物质对的选择性保留作用，其数值越大，越容易分离。 5）分离度（R） 分离度是反映色谱柱对相邻两组分直接分离效果的。而R值越大就意味着相邻两组份分离得越好。 3、初始操作条件的确定 1）确定初始操作条件 ·进样量 要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过mg/ml时填充柱的进样量通常为1~5μL，而对于毛细管柱，若分流比为50：1时，进样量一般不超过2μL。如果这样的进样量不能满足检测灵敏度的要求，可考虑加大进样量，但以不超载为限。 ·温度 进样口温度主要由样品的沸点范围决定，还要考虑色谱柱的使用温度。即首先要保证待测样品全部气化，其次要保证气化的样品组分能够全部流出色谱柱，而不会在柱中冷凝。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点最高的组分的沸点，但要低于易分解组分的分解温度，常用的条件是250~350℃。 色谱柱温度的确定主要由样品的复杂程度和汽化温度决定。原则是既要保证待测物的完全分离，又要保证所有组分能流出色谱柱，且分析时间越短越好。 检测器的温度是指检测器加热块温度，检测器温度的设置原则是保证流出色谱柱的组分不会冷凝同时满足检测器灵敏度的要求。大部分检测器的灵敏度受温度影响不大，故检测器温度可参照色谱柱的最高温度设定，而不必精确优化。 ·载气流速 载气流速的确定相对容易一些，开始可按照比最佳流速（氮气约为20cm/s，氦气约为25 cm/s，氢气约为30 cm/