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高效液相色谱法(HPLC)测定血清维生素A 营养学系：王冬亮 色谱法的发展 色谱法是一种现代的分离方法 1906年正式命名 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代 色谱法原理 色谱法的原理 是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附等各种作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。 两相中有一相是固定的,叫作固定相(Stationary Phase),有一相是流动的,称为流动相(Mobile Phase),流动相又叫洗脱剂,溶剂 相(Phase): 物理化学术语,特指在某一系统中,具有相同成分及相同物理、化学性质的均匀物质部分。各相之间有明显可分的界面 色谱法分离原理 色谱法分类 按流动相的物态分: 气相色谱 (Gas Chromatography, GC) 用气体作为流动相(又叫载气) 液相色谱 (Liquid Chromatography, LC) 用液体作为流动相(又叫洗脱剂) 按固定相的形态分: 平面色谱 纸色谱 薄层色谱 柱色谱 高效液相色谱的产生 经典液相色谱 大直径的玻璃管柱，室温和常压下用液位差输送流动相，柱效低、时间长(常有几个小时)。 高效液相色谱（High performance Liquid Chromat