拟南芥基因的图位克隆技术.pptVIP

* 拟南芥基因的图位克隆技术 拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种模式植物，具有基因组小（125 Mbp）、生长周期短等特点，而且基因组测序已经完成（The Arabidopsis Genomic Initiative, 2000）。 从遗传学的观点来看，基因克隆的途径可概括为正向遗传学和反向遗传学两种。 正向遗传学途径指的是通过被克隆基因的产物或表现型突变去进行 反向遗传学途径则指的是依据被克隆基因在染色体上的位置来实现 图位克隆（map-based cloning）又称定位克隆（positional cloning），1986年首先由剑桥大学的Alan Coulson提出，用该方法分离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行的，无需预先知道基因的DNA序列，也无需预先知道其表达产物的有关信息。它是通过分析突变位点与已知分子标记的连锁关系来确定突变表型的遗传基础。 图位克隆能实现，关键在于全基因组(Col-0生态型)测序计划的完成和各种分子标记的发现。这些数据被储存在专门的数据库中（表1）。 分子标记: 实现基因图位克隆的关键是筛选与目标基因连锁的分子标记。 分子标记是一个特异的DNA片段或能够检出的等位基因，对其有效地利用即可达到图位克隆基因之目的。 迄今为止，已有几十种技术可用于分子标记的筛选,其中最为常用的是简单序列长度多态性（SSLP）,和单核苷酸多态性