实验十一植物体内过氧化物酶活性的测定.pptVIP

下载本文档

27
0
约小于1千字
约 9页
2017-02-13 发布于天津
举报
版权申诉

实验十一植物体内过氧化物酶活性的测定.ppt

1、本文档共9页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

实验十一植物体内过氧化物酶活性的测定愈创木酚比色法一原理过氧化物酶过氧化物酶广泛存在于各种动物植物和微生物体内催化由过氧化氢参与的各种还原剂的氧化反应分子结构特点是一种由单一肽链与卟啉构成的血红素蛋白脱辅基蛋白分子须与血红素结合才构成全酶的主要生理功能参与活性氧代谢过程参与木质素和木栓质的合成参与生长素的降解注除了与植物正常代谢和生长发育相关的结构型外很大部分的合成属于诱导表达型二实验材料与试剂实验材料不同浓度处理的菱叶片试剂磷酸缓冲液磷酸缓冲液愈创木酚三实验步骤提取酶液叶片片磷酸缓冲液研磨离心

实验十一植物体内过氧化物酶活性的测定 ——愈创木酚比色法一、原理过氧化物酶过氧化物酶[perox idase, POD] 广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。催化由过氧化氢参与的各种还原剂的氧化反应: RH2+ H2O2→2H2O + R 2　POD 分子结构特点 POD 是一种由单一肽链与卟啉构成的血红素蛋白, 脱辅基蛋白分子须与血红素结合才构成全酶。 3、POD的主要生理功能参与活性氧代谢过程；参与木质素和木栓质的合成；参与生长素的降解。注：除了与植物正常代谢和生长发育相关的结构型POD 外, 很大部分POD的合成属于诱导表达型。二、实验材料与试剂实验材料：不同浓度Cd处理7d的菱叶片；试剂 0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH6.0） 0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH7.0）愈创木酚； H2O2。三、实验步骤提取酶液：叶片2片（w gFW）+pH7.0磷酸缓冲液5mL 研磨，离心（4000rpm*10min），上清液即为粗酶液。 2、配制反应液 1mol/L 磷酸缓冲液（pH6.0） 50ml +28uL愈创木酚+19uLH2O2(30%) 一般临用前配制，冰箱内短期保存。 2、酶反应 3mL反应液+0.2mL粗酶液，震荡混匀后立刻记时，以3mL反应液+ 0.2mL磷酸缓冲液调零，测OD470，30’’内读第一次数，之后每10S读数一次，至OD值1.000。 3、计算酶活性选取OD值变化较均匀的一段数据，代入公式计算；以每分钟OD值变化0.01作为1个过氧化物酶活力单位（U）。酶活力= W=W总（g FW)* V(mL)/V总 * * w(g FW) 活力单位(U) *