皂苷的测定和结果分析.docVIP

商陆中皂苷的测定和结果分析 1.实验目的 A：了解，掌握减压旋转蒸发仪浓缩的具体操作和主要步骤。 B：紫外蒸发光液相色谱法测定皂苷含量的具体方法步骤 C：不同的条件对商陆皂苷的影响 2.实验材料 仪器 量筒，三角瓶，超声机，旋转蒸发仪，真空抽滤装置，漏斗，滤纸，蒸发光液相色谱分析仪，坩埚，1mL注射器，有机相滤膜，水浴锅等等。 试剂 商陆皂苷对照品，蒸馏水，冰乙酸，甲醇，注射用水，正丁醇 3.实验方法 3.1 皂苷的浓缩分离：分别称取166mL的商陆水提液进行浓缩，浓缩到16mL，按1:4加入无水乙醇，充分搅拌，沉降。沉降后进行抽滤，取液体，固体保存。 3.2 饱和正丁醇和0.4%冰乙酸的制备：取正丁醇300mL,加入足量的水，超声20min，倒入分液漏斗中，充分摇匀，静置。 3.3 皂苷的萃取：分别皂苷分离液倒入分液漏斗中，按体积1:2加入饱和正丁醇，震荡，摇匀，静置，分离，取上层清液，还按1:2加入饱和正丁醇，震荡，摇匀，静置，分离，将两次的上层液体分别混在一起，摇匀。 3.4 样品的制备：分别取80%回收乙醇分离的上层液体和现配的80%乙醇分配的上层液体，及90%乙醇沉降所得的上层液体进行第3步操作。 3.5 过滤：分别把各个样品进行过滤，流动相也进行过滤，从而达到进样的要求。 3.6 进行蒸发光液相测定：分别用商陆标准品进样5μL和10μL进行测定，从而得到两点计算法的两个点便于计算。对照品进完之后，分别进样品，并进行数据的采集。 4实验结果 实验如下所示： 试剂 保留时间 峰高 峰面积 进样量 对照5μL 6.23294 15.66 171.99 5μL 对照10μL 6.22719 31.86 356.66 10μL 80%回收1 6.23048 40.87 506.60 10μL 80%回收2 6.20992 47.43 555.72 10μL 80%回收3 6.22637 37.26 433 10μL 80%现配2 6.22061 28.79 340.90 10μL 现配95%1 6.21486 35.89 410.60 10μL 现配95%2 6.18691 29.89 345.81 10μL 现配95%3 6.24034 19.06 227.21 10μL 浓缩166mL 1 6.20910 97.99 1142.37 10μL 浓缩166mL 2 6.19842 72.95 854.94 10μL 浓缩166mL 3 6.21650 36.24 488.18 10μL 5实验讨论 从出峰时间上看，说明了皂苷物品比较稳定，出峰时间差别不大。在6.21±0.03左右浮动。 从80%回收和80%现配的进行比较发现，回收的比现配的提取皂苷的含量多，原因：可能是应为回收的里面含有皂苷等物质，也许是应为回收的里面所含的水分比现配的多，因此，根据药典规定，提取的皂苷要比含水少的多。 从浓缩的的166mL对比发现，皂苷含量明显增多，但是并不能达到理论值，不与50mL的成比例，说明在皂苷的提取中有较大的损失。 在下一步是中，可以做一个已知浓度的皂苷和多糖混合液，然后，进行处理，最后看得到的多糖和皂苷含量，计算出回收率，进而粗略的计算出商陆中总皂苷和多糖的含量。 回收的乙醇可以用在工业生产上，减少成本，提高产品的质量。