通脉养心丸的实验和临床研究.pptVIP

动物实验 抗心肌缺血作用 抗血栓形成作用 增强常压和减压条件下的耐缺氧能力 临床试验 气阴两虚型冠心病、心律失常 减轻胸痛、胸闷憋气、心悸气短等症状 减少心绞痛发作频数 减少硝酸甘油的用量 实 验 研 究 实验一 对氯仿所致小鼠心律失常的影响 动物 小鼠 致心律失常药物 氯仿 观察指标 心脏停搏(CA)的潜伏期 室颤发生率(%) 实验分组： （1）模型组，蒸馏水 （2）通脉养心丸， 1g /kg 剂量组 （3）通脉养心丸， 2g /kg 剂量组 （4）通脉养心丸， 4g /kg 剂量组 （5）盐酸胺碘酮， 50mg/kg 剂量组 给药方法：灌胃给药一次，连续给药7天 图1 各组小鼠氯仿致心脏停搏(CA)(min)的比较 表1 通脉养心丸对氯仿所致小鼠心律失常的影响(n=10) 小 结 实验二 对氯化钡所致大鼠心律失常的影响 图2 各组大鼠氯化钡致心律失常持续时间（min）比较 小 结 实验三 对乌头碱所致大鼠心律失常的影响 小 结 实验四 对肾上腺素所致大鼠心律失常的影响 实验五 对实验性气阴两虚型大鼠心肌缺血的影响 动物：大鼠 致病因素：力竭性游泳 (每天上、下午强制游泳2小时，连续7天） 药物：垂体后叶素 观察指标：心电图 血清CK、LDH SOD活性和MDA含量 小 结 通脉养心丸能够改善实验性气阴两虚型大鼠注射垂体后叶素(Pit)后所引起的心肌缺血心电图的变化，对抗心肌缺血时心率减慢； 抑制受损心肌细胞释放CK、LDH； 升高SOD、降低MDA含量； 通脉养心丸具有抗气阴两虚型大鼠心肌缺血的作用。 实验六 抗大鼠心肌细胞缺氧损伤的作用及机理研究 模型：建立体外培养大鼠心肌细胞缺氧损伤模型 方法：血清药理学方法 目的：观察通脉养心丸抗大鼠心肌细胞缺氧损伤的作用，并探讨其作用机制，为临床用药提供实验依据。 研究内容 对细胞活力的影响 对氧自由基的影响 对心肌细胞内钙离子的影响 对炎症反应的影响 对心肌细胞凋亡的影响 检测指标 MTT比色法测定细胞活力 心肌酶：LDH、CK 氧自由基方面：SOD、MDA、GSH、NO 细胞内钙离子([Ca2+]i)浓度变化 炎性因子：IL-6、IL-1β 流式细胞仪双标记法检测细胞凋亡率 分组 空白对照组 缺氧损伤组 通脉养心丸 1g/kg 2g/kg 4g/kg 8g/kg 图19 通脉养心丸对缺氧心肌细胞凋亡率的影响 小 结 通脉养心丸能够提高正常大鼠心肌细胞及缺氧损伤心肌细胞活力 降低心肌细胞缺氧损伤后LDH、CK的释放 通脉养心丸有显著升高SOD活性，升高GSH浓度，降低MDA、NO浓度的作用 降低炎症因子IL-6、IL-1β的表达 降低缺氧损伤心肌细胞凋亡率 减少缺氧损伤后造成的细胞内钙离子浓度升高 实验七 安全性评价 急性毒性试验 长期毒性试验 急性毒性研究 实验目的：观察24小时多次灌胃给药，动物在短期内出现的急性毒性反应，为临床安全用药提供参考信息 受试药物：通脉养心丸药粉 实验动物：小鼠，雌雄各半，每组20只 给药方法：禁食12小时，自由饮水，给药体积 0.4g/10g体重；24h内给药2次。对照组给同体积蒸馏水 毒性反应情况：一般表现、呼吸、活动、有无惊厥、中毒发生时间、持续时间、恢复情况、死亡动物的大体解剖情况 观察时间：14天 急性毒性结果 24小时给药剂量累计32g药粉/kg，相当于临床用量（0.133g/kg）的240倍 药后连续观察14天，小鼠未见明显毒性反应 长期毒性研究 实验目的：观察可能产生的毒副作用及其严重程度，确定药物安全剂量范围，为人临床安全用药提供依据。 受试药物：通脉养心丸药粉 实验动物：大鼠，雌雄各半，每组30只 给药剂量：8、4、2g/kg，相当人(按60kg计)临床剂量60、30、15倍 给药时间：90天 停药观察：15天 观察指标： 一般状况观察：体重、饮食、行为活动等 尿液常规指标 血液学指标 血液生化学指标 系统解剖 脏器称重 病理组织学检查 长期毒性结果 实验期间各组动物均未出现死亡 对动物的平均体重、进食量、精神状态、行为活动、二便等一般