离子色谱法直接测定牛奶和果汁中的甜蜜素含量.doc

离子色谱法直接测定牛奶和果汁中的甜蜜素含量 郑琦1 李欣1 王鹏举1 李建华2 （1．库尔勒出入境检验检疫局，新疆 841000 2. 瑞士万通中国有限公司，北京，100005） 摘 要：建立了英蓝渗析-离子色谱法直接测定牛奶和果汁中甜蜜素的方法，采用2.4 mmol/L Na2CO3 + 2.0 mmol/L NaHCO3 +5%的丙酮溶液作为淋洗液，方法的线性范围1.0～50.0 mg/L，相关系数0.9991，RSD≤6.0%，加标回收率80.3~110.7%，方法灵敏度高，重现性好，预处理简单，适合食品检测工作需要。 关键词：离子色谱 甜蜜素 牛奶 果汁 1. 前言 甜蜜素，化学名称环己基氨基磺酸钠（英文名称： N-Cyclohexylsulfamic acid sodium salt， 图1.），是一种人工合成的非营养型甜味剂，其甜度是蔗糖的30~40倍，在食品加工中可以 代替蔗糖或与蔗糖混合使用。近年来研究发现，甜蜜素在人体新陈代谢中能够转化为环己胺， 具有潜在的致癌性，且能诱发肥胖症、冠心病、高血压、糖尿病、膀胱癌等疾病。一些国家 和地区如美国、加拿大、欧盟、日本和香港等禁止使用甜蜜素作为食品甜味剂。目前我国允 许甜蜜素使用，国标[1]规定甜蜜素可在一定范围内限量使用，但是如果超量使用，会引起食品安全问题，影响消费者的身体健康。因此对食品中甜蜜素的监督检测很有必要。 /Shop/product.asp?id=203748 目前在食品检测行业中对甜蜜素测定研究的常用方法有比色法[2]、薄层色谱法[3]、气 相色谱法[4]、液相色谱法[5]、离子色谱法[6]、液质联用法[7]等。气相色谱法检测时需要将甜蜜素进行衍生化反应，液相色谱法检测时需将其转化为N，N-二氯环己胺，液质联用法检测灵敏度较高，能够得到分子结构信息，在定性上具有很大优势，但仪器成本较高。样品前处理在食品检测过程中非常关键，复杂或者繁琐的前处理对回收率的影响很大，从而影响检测结果。本文利用万通英蓝（inline）渗析装置在线处理样品，采用离子色谱-化学抑制电导检测器直接测定果汁和牛奶中的甜蜜素，该方法前处理过程只需将样品稀释即可进样分析，无需其他化学试剂和衍生化反应，分析成本低，操作简单方便，适用于牛奶、果汁等液体水性样品的批量分析。 2. 实验部分 2.1 仪器与试剂 861 Advanced Compact 离子色谱仪（瑞士万通公司），配化学抑制电导检测器、813 型 自动进样器、833 型Liquid Handling Dialysis Unit（配inline 渗析池）、微填充床抑制器，低 脉冲串联式双活塞往复泵、双通道蠕动泵、ICNET2.0离子色谱工作站。 甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）标准品：纯度≥99%（德国Dr.Ehrenstorfer GmbH公司）， 碳酸钠（优级纯），碳酸氢钠（优级纯），丙酮（色谱纯），硫酸（分析纯），实验用水为电阻 率大于18.2 MΩ·cm的超纯水。 2.2 标准溶液的制备 准确称取25 mg（精确到0.01 mg）甜蜜素固体于25mL容量瓶中，加入适量水溶解后 定容得标准储备液（1000.0 mg/L），分别移取0.025、0.125、0.25、0.50、1.25标准储备液于 25.0 mL容量瓶中，加水定容至刻度得1.0、5.0、10.0、20.0、50.0 mg/L标准工作溶液。 2.3 样品处理 准确称取2.00g（精确到0.01g）牛奶或果蔬汁样品于100 mL容量瓶中，超纯水稀释50 倍并定容（稀释倍数可根据实际样品的浓度调整），超声混匀后转入样品管，通过Dialysis Unit 渗析模块的渗析池渗析进样，渗析膜孔径0.20 μm，渗析时间9.10 min。 2.4 色谱条件 色谱柱：Metrohm A SUPP 4-250型阴离子色谱柱（250 mm×4 mm）；Metrosep RP Guard 保护柱；柱温：25 ℃；流动相：2.4 mmol/L Na2CO3 + 2.0 mmol/L NaHCO3 +5%的丙酮溶液； 流速：0.8 mL/min；进样量：20 μL；抑制器溶液：50 mmol/L硫酸溶液，超纯水冲洗。 /Shop/product.asp?id=40697cid=s=page=2 3. 结果与讨论 3.1 实验条件的优化 3.1.1 流动相的选择 甜蜜素在碱性条件下电离生成相应的环己基氨基磺酸盐，实验采用Na2CO3-NaHCO3缓冲盐体系，实验过程中分别测试了Na2CO3：NaHCO3=1.3：2.0、2.4：2.0、1.8：1.7、3.2： 1.0、1.0：4.